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更年春方对卵巢切除大鼠学习记忆能力和海马ER亚型的调节 王文君 赵凡桂 李大金 复旦大学附属妇产科医院 研究背景 绝经后妇女 骨质疏松症 记忆力减退 皮肤衰老 …… 世界人口 老龄化 研究背景 绝经后妇女阿尔茨海默病(AD)发病率↑ E2↓→学习记忆能力↓ ↗保护海马→学习记忆能力↑ 性激素替代治疗(HRT) ↘子宫内膜癌乳腺癌发病风险↑ ↓ HRT使用受限 研究背景 中医中药治疗有良效,基本无副作用。 “肾藏精, 肾主骨生髓、通于脑, 脑为髓之海 ” 围绝经期肾阴虚 髓海不足 健忘等 研究背景 更年春方(GNC)方组成 仙灵脾、 知母、白芍、黄连等 GNC方治则 滋肾柔肝清心泻火 研究背景 研究背景 动物实验发现GNC可能通过提高ER含量对神经内分泌免疫网络起良性调控作用 GNC - - ?- - SERMs 通过对不同组织ER亚型的调节,发挥延缓全身各器官衰老的作用,避免类雌激素副作用。 研 究 目 的 选取机体老化过程中具有代表性的组织器官如骨、脑、皮肤、子宫及血脂代谢指标 进一步研究补肾中药“GNC”的抗老化作用及其机理,从而深化肾本质的研究。 实验技术路线 ▲ 称大脑湿重 ▲ 左侧大脑病理学和免疫组化 ▲ 右侧海马real time PCR测定ERα、 ERβ、BDNF、AChE、ChAT、ACh表达 。 Morris 水迷宫 定向航行实验:测量大鼠的学习记忆能力 空间搜索实验:测量大鼠记忆保持能力 结 果 大鼠的一般表现和血清E2的变化 大鼠大脑湿重与体重比值的变化 Morris水迷宫试验成绩的变化 海马ERmRNA及蛋白表达的变化 大鼠一般表现 N组大鼠体重明显增加,毛发干枯。 S、H和E组毛发较有光泽,体重增加不明显。 L组介于N组与其他三组之间。 血清E2的变化(n=9) Compare with S group, ## p0.01, # p0.05 Compare with N group, ** p 0.01 大鼠大脑湿重与体重的比值 Compare with N group, **p 0.01 Compare with S group, ##p0.01, # p0.05 Morris 水迷宫平均逃避潜伏期 Compare with N group, *p 0.05 Compare with S group, #p 0.05 Morris 水迷宫平均逃避潜伏期 Morris水迷宫空间搜索穿越平台次数 Compare with N group, *p0.05 空间搜索实验中各组大鼠典型搜索途径 结 果(1)S组大鼠海马中ERα和ERβ mRNA表达比较 结 果(2) S组大鼠海马ERα和ERβ阳性细胞比例的变化 Compare with ERαgroup , * p0.05 结 果(3) S组海马ERα和ERβ免疫组化的比较 结 果(4)ERα和ERβmRNA在各组大鼠海马中表达的变化 Compare with S group, ## p0.01. Compare with N group, ** p0.01; *p0.05 结 果(5) ERα和ERβ mRNA在各组大鼠海马中表达的变化 结 果(6)ERα和ERβ阳性细胞比例在各组大鼠海马中的变化 Compare with N group, ** p0.01; Compare with S group, ## p0.01; 结 果(7) ERα和ERβ阳性细胞比例在各组 大鼠海马中的变化 讨 论(1) Markham 总结报道选择12月龄大鼠切除卵巢建立模型比较合适 本实验中大鼠为10-12月龄 据血清E2 、阴道涂片 卵巢切除完全 学习记忆能力↓ 模型建立成功 讨
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