中国农业大学生物化学--DNA生物合成.pptxVIP

蛋白质 核酸 碳水化合物 脂类生物大分子氨基酸 核苷酸葡萄糖 脂肪酸/甘油 构件分子 6-磷酸-葡萄糖 丙酮酸 共同降解物 乙酰COA 电子传递链 氧化磷酸化 代谢终产物含氮终产物ADP ATP 尿素循环TCA循环o2CO2+ H + e-H2O 功能型生物信息 大分子的组装第十三章DNA的生物合成第十四章RNA的生物合成第十五章 蛋白质的生物合成第十三章DNA的生物合成引言 中心法则第一节DNA的生物合成第二节 DNA的损伤与修复★★ DNA 是主要的遗传物质DNA 中心法则◆ 复制◆ 转录◆ 翻译RNA蛋白质底物：dNTP DNA合成的通式★★★第一节、DNA的生物合成（一）半保留复制（二）DNA复制所需的酶类及 蛋白因子（三）DNA的复制过程(大肠杆菌) （四）真核细胞的DNA复制（五）复制高度准确性的保障（六）逆转录（一）半保留 复制半保留复制 的定义…（一）半保留 复制◆ 实验证据: 1958 Meselson and Stahl半保留复制的生物学 意义？ →超螺旋的解旋？ →双螺旋的解旋？ →单核苷酸链的稳定？ →复制的具体过程？←←←拓扑异构酶I拓扑异构酶II1、由拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ 作用解开超螺旋；2、由解旋酶作用打开双 螺旋；5’ →3’：解旋酶3’ →5’：rep蛋白3、由DNA单链结合蛋白(SSB)稳定单链DNA，开始复制；4、定点启动， “双向”复制；复制叉：复制眼 ◆ 眼状结构（θ结构）：目前在原核生物中发现的参与DNA合成的三种DNA聚合酶，它们均无从头合成DNA的能力，只能延长已有的多核苷酸链。5、RNA引物的合成： (引物酶与引物体的作用) 方向性：5’ → 3’6、由DNA聚合酶Ⅲ沿RNA引物开始DNA的合成：链的延长具有严格的方向性：5’ → 3’7、DNA的半不连续复制：酶作用的严格的延长方向的制约所导致。7、DNA的半不连续复制：前导链，后随链。冈崎片段：5’→3’，1000~2000bp， 7~11s 的均一小片段。8、RNA引物的切除与填补及子链DNA片段的连接：DNA聚合酶Ⅰ切除引物并合成DNA填补片段；DNA连接酶完成各片段的连接。 →超螺旋的解旋….. →双螺旋的解旋…… →单核苷酸链的稳定.. →复制的具体过程….DNA的复制策略：1、由拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ作用解开超螺旋；2、由解旋酶作用打开双螺旋3、由DNA单链结合蛋白(SSB)：稳定单链DNA4、定点启动， “双向”复制：复制叉、复制眼5、RNA引物的合成：引物体、方向6、由DNA聚合酶Ⅲ沿RNA引物开始DNA的合成7、DNA的半不连续复制：冈崎片段8、RNA引物的切除与填补及子链DNA片段的连接第一节、DNA的生物合成（一）半保留复制（二）DNA复制所需的酶类及 蛋白因子（三）DNA的复制过程(大肠杆菌) （四）真核细胞的DNA复制（五）复制高度准确性的保障（六）逆转录★★★（二）DNA复制所需的酶类 及蛋白因子： 1、拓扑异构酶Ⅰ，Ⅱ。 2、解旋酶和rep蛋白。 3、单链DNA结合蛋白 (SSB)。4、引物酶与引发体。DnaA、DnaB、DnaC蛋白 5、DNA聚合酶Ⅲ.Ⅰ.Ⅱ。 DNA聚合酶III： DNA生物合成中主要的复制酶功能: DNA链延伸的主要DNA聚合酶.全酶(holoenzyme)包括10种亚基具5’→ 3’聚合酶活性具3’ →5’外切酶活性:能纠正错误DNA聚合酶III 的复杂结构使其具有更高的忠实性、协同性和持续性。DNA聚合酶I (DNA pol Ⅰ)单链；109kD；含1个Zn；特异的蛋白酶可将其降解为一大和一小两部分较大的部分叫Klenow片段，具5’→ 3’聚合酶活性；具3’ →5’外切酶活性；能纠正错误小片段：具5’ →3’外切酶活性;切除受损伤的DNA小片段和RNA引物并填补空缺.在基因工程中被广泛应用。 具有校对功能Klenow fragment4、引物酶与引发体。 5、DNA聚合酶Ⅲ.Ⅰ.Ⅱ。 同时具有校对功能原核生物的与真核生物的 特点及区别。 6、DNA连接酶。第一节、DNA的生物合成（一）半保留复制（二）DNA复制所需的酶类及 蛋白因子（三）DNA的复制过程(大肠杆菌) （四）真核细胞的DNA复制（五）复制高度准确性的保障（六）逆转录★★★（三）DNA的复制过程 起始、延长、终止。☆ 起始： 起始点、复制叉、 眼结构（?结构）、 单链结合蛋白。 复制子：是在DNA分子上，每次复制发生的单位。包括从复制的起始位点－原点ori 直到终止位点ter的全部DNA序列。大肠杆菌的染色体就是一个复制子。大肠杆菌的基因组从单一的原点开始，双向复制。??原点记做ori C（一