弧菌幻灯片.ppt

* * 气单胞菌属 生长现象：TCBS上不生长，血平板：灰白、光滑、凸起菌落，肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落 生化反应：氧化酶＋、触酶＋、发酵葡萄糖产酸产气、6.5％NaCl不生长、O129耐受 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药 * * 气单胞菌属－临床意义 致病物质：溶血毒素、细胞毒素 所致疾病： 肠道感染是夏季腹泻常见病原菌 肠外感染有败血症、伤口感染等 * * 鉴定依据 革兰阴性杆菌，丛鞭毛 肠道选择平板上无色透明菌落 氧化酶＋、葡萄糖发酵＋ O/129：R TCBS：－ 7.0％NaCl：－ 邻单胞菌属检验程序 标本 增菌 分离培养 （血平板、Mac） 全面生化反应 可疑菌落 肠毒素测定 初步生化反应 涂片 染色镜检 血标本 氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验 * * 邻单胞菌属－主要性状 只有一个菌种：类志贺邻单胞菌 革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽胞，无荚膜 兼性厌氧，营养要求不高 在SS平板形成不发酵乳糖菌落 氧化酶＋，葡萄糖发酵＋ O/129：S TCBS：不生长，6.5％NaCl不生长 赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均＋ 多数菌株产β-内酰胺酶，对青霉素耐药 * * 邻单胞菌属－鉴定 与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学 与气单胞菌属鉴别：O/129S，肌醇试验＋ 与弧菌属鉴别： Mac 、 SS生长，TCBS、6.5％NaCl不生长 * * 邻单胞菌属－临床意义 腹泻、食物中毒，多见于夏季 败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高 * * * * 培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸，常用pH8.4－9.2碱性培养基 在液体培养基中形成菌膜 菌落圆形、较大、扁平 * * 霍乱弧菌常用培养基 碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS） 霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色 4号琼脂、庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾） 生长并将培养基中的碲离子还原成元素碲,形成灰褐色菌落中心 * * * * 分离培养 标本接种碱性蛋白胨水增菌6－8小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂， TCBS：出现黄色菌落 庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落 * * 鉴定 生化反应：氧化酶、粘丝试验、霍乱红反应 发酵蔗糖，动力阳性 赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴性 可以在无盐培养基上生长 在含有高于6%氯化钠的培养基上不能生长 确定血清群：O群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为O1或O139群 确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别 确定生物型： CVC EVC 第Ⅳ组噬菌体裂解试验(106)： + -/(+) 多粘菌素B敏感试验(50U)： S R 鸡红细胞凝集试验(2.5%): -/(+) +/(-) V-P试验、溶血试验(1%羊)： - +/(-) 抵抗力 可在河水、井水及海水中存活20天左右 对热、干燥和光敏感；100℃1~2min即死亡 怕酸耐碱，在正常胃酸中仅能生存4min 对常用消毒剂敏感，0.5ppm氯15min能杀死 对庆大霉素耐药 * * 副溶血性弧菌 * * 副溶血性弧菌－生物学性状 革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽胞，无荚膜 营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5％NaCl，超过8%不能生长无盐培养基不生长 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜 TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞 嗜盐性选择平板: 较大，圆形，隆起，稍浑浊，半透明或不透明，无粘性 SS平板: 扁平，无色半透明，蜡滴状菌落，有辛辣味，不易刮下，48h后牢固粘着培养基上，部分菌株不能生长 麦康凯平板: 部分菌株不生长 伊红美兰琼脂和中国兰琼脂培养基不能用于本菌的初次分离 * * * * 副溶血弧菌 “副溶血”是为了纪念首次发现时该菌的特殊溶血现象： 普通血平板呈r或a溶血，但在含7％高盐甘露醇的人O型血或兔血的平板上呈?溶血。该溶血现象称神奈川现象。现已证明产生该现象的菌株（KP＋）即为产毒株 临床意义 具有嗜盐性 存在于近海的海水、海底的沉淀物、鱼虾类和贝壳及盐渍加工的海产品中 主要引起食物中毒和急性腹泻 是我国沿海地区及海岛食物中毒的最常见病原菌 胃肠炎临床表现有：恶心、呕吐、腹痛、低热、寒战等。腹泻呈水样便，偶尔血性，恢复较快，病程2~3天，通常为自限性 还可引起伤口感染和菌血症 致病物质 通过菌毛的粘附