液相维修保养讲座幻灯片.ppt

Waters? ConnectionsSM HPLC 常见故障分析及日常保养知识 HPLC的梯度系统 Waters? ConnectionsSM 能引起HPLC发生问题的潜在因素: 机械方面,化学方面,环境方面,操作方面,保养方面 工作环境: 如电源及地线,湿度,灰尘,环境温度等; 化学品: 如溶剂质量,样品状况,色谱柱/保护柱状况等; 机械方面: 泵,进样器,检测器,在线过滤器, 管路连接质量等; 操作保养: 正确的操作程序,完善地日常及定期保养; Waters? ConnectionsSM  分析系统工作状况的最直观的表现: 系统压力 色谱图 - 基线 峰形 重叠谱图(重现性) Waters? ConnectionsSM 基线问题分析 Waters? ConnectionsSM 基线噪声 流动相内含有空气 - 脱气处理 泵有问题. 如单项阀,梯度阀,泵杆及密封件的问题 清洗或更换 系统有漏液之处 - 检漏并处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口家适当反压,如接一段内径常 0.009“的管子(此 法只适用于UV检测器 !!!) 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池 Waters? ConnectionsSM 基线周期性噪声 绝大多数情况下是来源于泵的问题 泵头内有气泡 - 流动相脱气 ,泵头排气(注意正确的排气方法) 泵进出口阀有问题 - 清洗或更换阀组件 柱塞杆有问题 - 更换柱塞杆及其密封圈 溶剂混合不良 - 加装混合器 电噪声 - 去除噪声源 Waters? ConnectionsSM 非周期性噪声 气泡 - 流动相脱气 检测池内有气泡 - 流动相脱气, 检测池后加适当反压 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源 Waters? ConnectionsSM 基线漂移 系统未充分平衡 环境温度影响 (尤其对示差,电导,电化学检测) - 室温,柱温,检测池温度控制 梯度系统 - 溶剂A于溶剂B的ABS值相差大 - 试用另种溶剂 色谱柱污染或有其他组份被洗脱出 - 冲洗, 直至基线稳定 溶剂发生变化 (如溶入气体或溶剂挥发) - 氦气或脱气机脱气, 溶剂瓶避光,密封(但要 注意防止溶剂瓶内产生负压) 系统有漏液之处 - 检漏并处理 Waters? ConnectionsSM 基线周期性波动 温度影响 - 环境温度及检测池温度控制. 注意空调机的影响 溶剂混合不良 - 加装混合器 流动相脱气不良 - 流动相脱气 供电电源的影响 泵不良 - 检修处理 Waters? ConnectionsSM 基线有无规律的尖峰 气泡 - 溶剂脱气 电路接触不良 - 保证清洁, 接线牢固, 接点无氧化 光源灯不良- 检查处理 电噪声 - 去除噪声源 Waters? ConnectionsSM 脱气方法 在线脱气机脱气 氦气脱气 真空过滤脱气 注意: 溶剂应每天脱气 Waters? ConnectionsSM Waters? ConnectionsSM Waters? ConnectionsSM 为什么会得到变形的色谱峰 所有色谱峰都变形（变坏）？ 诱发原因 展宽是以下两种因素的综合结果：仪器/系统影响; 色谱柱的影响; 进样器 连接管线 进样器至色谱柱 色谱柱至检测器 接头及筛板 检测池体积 进样体积 色谱柱本身 死体积 筛板阻塞 谱带展宽体积与系统体积 色谱柱安装及连接好坏带来的影响 确保色谱柱适当连接 确保螺钉和锥箍固定在合适位置 连接管线对系统谱带展宽的影响 实例：管线内径对柱效的影响—在色谱柱与进样器之间使用不同内径的管线 谱带展宽对分离度的影响 ES- TIC 系统性能考察- 谱带展宽试验 仪器谱带展宽试验 (不接色谱柱) 将色谱柱从系统上卸下来，连接换上零死体积两通 流速：1 mL/min. 用单波长紫外检测器测定。(not a PDA/DAD) 用流动相稀释测试混合物使检测器产生0.5-1.0 AUFS 的响应(可以使用系统启动测试混合物，其中含有尿嘧啶、对羟基苯甲酸乙酯和羟基苯甲酸丙酯; Waters部件号：Wat034544) 进样2 到 5uL上述溶液 使用5 sigma 法测量峰高4.4%处的峰宽：谱带