细菌与病毒的微生物学检查法2幻灯片.ppt

Biofosun微生物鉴定药敏分析系统 先德（Sensititre）微生物鉴定和药敏分析系统 ATB半自动鉴定药敏测试系统 AutoScan-4半自动微生物鉴定及药敏测试系统 先德AutoReader半自动细菌鉴定和药敏分析系统 临床标本的采集与处理 一、标本采集的一般原则 1.病程早期、急性期或症状典型时， 使用抗生素前。 2.无菌采集 应无污染，严格进行无 菌操作。 3.根据目的菌的特性用不同的方法采集 适量标本，采集量不应过少。 4.注意在不同病程采集不同部位标本。 5.采集标本时要防止传播和自身感染。 6.检查病原体的特异性IgG抗体时，应采集急性期和恢复期双份血清，只有当恢复期血清抗体效价比急性期的效价明显升高达4倍或以上时，方有诊断价值 二、标本的处理 1.标本保存在4℃环境中，在2h之内送检。 脑脊液则要在25 ℃保存，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。对环境敏感的细菌应保温并立即送检,床旁接种可提高病原菌检出率。 2.标本中可能含有致病菌，必须注意安全 防护。切勿污染环境。对于烈性传染病 标本运送时更要由专人运送，严格按规 定包装。 3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管 内运送，有时可直接用抽取标本的注射 器运送。 有可靠的标本质量评价方法 例如以下情况标本不合格： 痰标本中＞10上皮细胞/低倍视野，＜25个白细胞/低倍视野 痰拭子找抗酸杆菌或真菌 标本量不够 样本拒收标准 样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符； 样本以不当的温度、运送培养基及容器运送； 样本量不足、已被防腐剂固定或运送时间过长； 样本外漏、容器破损及明显受污染的标本 样本的检验项目申请不适合进行； 当日重复送标本（除血培养外）。 常见感染标本的种类采集方法和输送须知 血液样本 避免污染，抽血时刻必须在病人温度上升前一小时内，共抽血三次（仅抽血一次的分离率为80%，二次为90%，三次为99%） 方法： 先以肥皂清洗皮肤污垢→穿刺静脉皮肤、血培养瓶口及抽血者手指的消毒（70%酒精→2%碘酒1~2min →70%酒精） 血液样本 标本量 普通抽取10ml 疑似霉菌抽取5ml 婴儿或小孩抽取1~2ml 培养瓶 将血液平均分别注入两血液瓶（蓝色盖嗜氧瓶和黄色盖厌氧瓶），婴儿或小孩则注入Ped Plus血液瓶内（粉红色瓶盖）；疑似结核或霉菌感染抽血5ml，注入MYCO/FLYTIC培养瓶（红色瓶盖），上下振摇数次。 血液样本 注意事项： 发烧病人每天抽血次数以三次为原则，至少抽两套，间隔至少30min，若为危重病人，须在不同部位抽取 抽血后无需更换针头即可注入血瓶中 抽血前即应贴好标签，标签不能贴到条形码 若不能离立即送至实验室，应置于35℃ 温箱或室温，绝不可放置冰箱 尿液标本 样本收集后，若不能马上送检或接种于适当的培养基时，应将样本置于4-8 ℃内保存，最好不要超过2小时 步骤： 先用水和中性肥皂清洁阴部→弃前段尿液→小心收集中段尿液20-30ml →盖上盖子，送检 注意事项： 收集尿液过程中，请勿将手伸入容器中，且尿液勿满出容器外，以免污染（以无菌导管技术收集尿液的方法已被淘汰） 。 生殖道标本 生殖道标本需2支无菌棉花拭子，分2次收集，其中一支用来直接涂片 标本采集： 发育期或成年妇女抹片，要有尿道口、子宫颈或直肠（怀疑淋球菌时做） 年幼女童：外阴部位取标本 男性：怀疑急性淋病：尿道分泌物；怀疑慢淋：前列腺或精囊 注意事项： 从冰箱取出标本需先恢复室温，接种后即刻 置35℃温箱；棉花拭子可直接接种 脑脊液标本 方法： 70%酒精或2%碘酊消毒背部下方皮肤→局部麻醉→以通管 针，轻轻的由第三与第四腰椎间的中线部位穿刺入脊髓蛛网膜。 注意事项： 细菌培养样本保存于35℃温箱 抽取的脑脊液分置于无菌试管中，迅速 送至实验室 病毒、霉菌、分支杆菌培养样本置4 ℃ 保存待送。 粪便或直肠拭子样本 直肠拭子样本采集方法： 肥皂、水和70%的酒精清洁肛门周围→用一根浸过生理盐水或液体培养基的拭子，插入肛门约5mm处，轻轻转动，以便使之与直肠粘膜之表层接触→取出置输送培养管，即刻送检。 注意事项： 挑取粪便的粘液、组织、脓或血液部分 怀疑腹泻病原菌，送检前与微生物科联络，并于检验单上注明； 特别注意接种迅速。 痰标本 取样步骤： 以清水或牙刷清洁口腔和牙齿，不用牙膏→从呼吸道深部咳出痰，置40ml无菌塑胶容器，盖上盖子→ 4℃保存待送检。 小孩可用清晨未进食或水前的胃内容物（加10%Na2CO3）代替， 注意事项： 清晨时痰量较多，且可能含有较 多量的病原菌 脓或伤口标本 标本采集步骤: