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脑脊液常规检查标准操作手册
1.目的:建立脑脊液常规检查的标准化操作;
2.范围:适用于脑脊液的常规检查(物理检查、蛋白定性、细胞检查);
3.标本采集:
3.1 标本种类:.2 标本要求:
3.3 遇高蛋白标本时可采用EDTA K2抗凝。
.标本储存:送检。
.标本运输:室温运输。
.标本拒收标准:污染,标本:显微镜
(1)观察颜色。 (2)观察透明度。
(3)观察凝块或薄膜:收集脑脊液于试管内,静置12-24小时,正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。
7.2 结果判断与分析:
7.2.1颜色:正常脑脊液是无色透明的液体。在病理情况下,脑脊液可呈不同颜色改变:
(1)红色:常由于各种出血引起。脑脊液中出现多量的红细胞,主要由于穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血引起。前者在留取三管标本时,第一管为血性,以后两管颜色逐渐变淡,红细胞计数结果也依次减少,经离心后上清液呈无色透明。当蛛网膜下腔或脑室出血时,三管呈均匀红色,离心后上清液显淡红色或黄色。红细胞在某些脑脊液中5分钟后,即可出现皱缩现象,因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。
(2)黄色:可因出血、梗阻、郁滞、黄疸等引起。陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血,由于红细胞缺乏蛋白质和脂类对膜稳定性的保护,很易破坏、溶解,出血4-8小时即可出现黄色。停止出血后,这种黄色仍可持续3周左右。椎管梗阻如髓外肿瘤,格林-巴利综合征,当脑脊液蛋白质量超过1.5g/L时,颜色变黄,其黄色程度与蛋白质含量呈正比。化脓性脑膜炎、重症结核性脑膜炎时,因脑脊液蛋白质含量明显增加而呈淡黄色或黄色。重症如核黄疸、新生儿溶血病时脑脊液也呈黄染。
(3)白色或灰白色:多因白细胞增加所致常见于化脓性脑膜炎。
(4)褐色或黑色:常见于脑膜黑色素瘤。
7.2.2 透明度:正常脑脊液应清晰透明。病毒性脑炎、神经梅毒等疾病的脑脊液也可呈透明外观。脑脊液中白细胞如超过300×106/L时可变为混浊;蛋白质含量增加或含有大量细菌、真菌等也可使其混浊;结核性脑膜炎常呈毛玻璃样微混;而化脓性脑膜炎常呈明显混浊。
填写报告时用“清晰透明”、“微浑”、“浑浊”等描述。
7.2.3 凝块或薄膜:正常脑脊液不形成薄膜、凝块和沉淀物。若脑脊液内蛋白质包括纤维蛋白质多于10g/L即可出现凝块或沉淀物,结核性脑膜炎的脑脊液静置12-24小时后,可见表面有纤维的网膜形成,取此膜涂片检查结核杆菌,阳性率较高。蛛网膜下隙梗阻时,由于阻塞,远端的脑脊液蛋白质含量常高达15g/L,此时脑脊液呈黄色胶冻状。
填写报告百可用“无凝块”、“有凝块”、“有薄膜”、“胶冻状”等描述。
8.蛋白定性试验(潘氏法):
8.1实验原理
8.2试验方法:取潘氏试剂2-3ml于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液1-2滴,衬以黑背景,立即观察结果。
8.3结果判断:
阴性:清晰透明,不显雾状;
极弱阳性(±):微呈白雾状,在黑色背景下才能看到;
弱阳性(+):灰白色云雾状;
阳性(+):白色浑浊;
强阳性(3+):白色浓絮状沉淀;
最强阳性(4+):白色凝块;
9.细胞检查:在显微镜下进行检查。
每μl血液内红细胞数
例示:血液内红细胞4 000 000/μl; 脑脊液内红细胞20 000/μl;
血液内白细胞10 000/μl; 脑脊液内白细胞60/μl
20 000×10 000
则:60- =60-50=10; 即该患者脑脊液内白细胞之校正数为10。
4 000 000
9.2.3 成人脑脊液内无红细胞,白细胞极少,其参考范围:
腰池中为(0-10)×106/L;脑室内为(0-5)×106/L;
儿童为(0-15)×106/L,新生儿为(0-30)×106/L。
如白细胞达(10-50)×106/L为轻度增加,(50-100)×106/L为中度增加,200×106/L以上显著增加。
9.3 细胞分类:
9.3.1 直接分类法:白细胞计数后,将低倍镜换为高倍镜,直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞,应数100个白细胞,并以百分率表示。若白细胞少于100个,应直接写出单核、多核细胞的具体数字。
9.3.2 染色分类法:如直接分类不易区分细胞时,可将脑脊液离心沉淀,取沉淀物2滴,加正常血清1滴,推片制成均匀薄膜,置室温或37℃温箱内待干,进行瑞氏染色后用油镜分类。
如见有不能分类的细胞,应另行描述报告,如脑膜白血病或肿瘤时。
9.3.3正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞,多为淋巴细胞及大单核细胞,两者之比
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