天然药化 第八章 甾体及其苷类课件.ppt

天然药物化学 讲 授：张 辰 露 第1-12周 白首乌 紫花洋地黄 2.海洋甾体化合物 海洋甾体化合物有抗肿瘤活性。 如从海绵中分离的具有强细胞毒的新鞘类酯糖苷就具有抗癌活性。 常见的含强心苷的天然药物 铃兰、紫花洋地黄 黄花夹竹桃 羊角拗 蟾酥 ⑵对二甲基苯甲醛反应： 将强心苷醇溶液滴在滤纸上，干后，喷对二甲氨基苯甲酸试剂(1%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液-浓硫酸4:1)，并于90℃加热30秒，如有2-去氧糖，可显灰红色斑点。 ⑶呫吨氢醇反应： 取少量强心苷固体样品，加呫吨氢醇试剂（10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸，加入1ml浓硫酸），置水浴上加热3分钟，只要分子中有2-去氧糖都能显红色。 ⑷过碘酸-对硝基苯胺反应： 过碘酸能与强心苷分子中的2-去氧糖氧化生成丙二醛，再与对硝基苯胺缩合而呈黄色。这个显色反应可作为薄层层析和纸层析的显色。 五、强心苷的提取和分离 从药材中分离提纯强心苷是比较复杂与困难的，应考虑强心甙在药材中存在的状况及其性质和共存物的影响等。 一般强心苷在药材中的含量都比较低（1%以下），又常与性质相似的皂苷混在一起，此外还有糖类、色素、鞣质等共存，这些成分的存在往往会影响改变强心苷在许多溶剂当中的溶解度，而且同一药材中又常含有几个或甚至几十个性质近似的强心苷，每个苷又有原生苷、次生苷或苷元之区别，这些都使提纯变得困难。 用鲜原料提取原生苷时，要防止酶解，在提取前必须抑制酶的活性，新鲜原料采收后，应低温快速干燥或通风阴干。强心苷性质较不稳定，在有水情况下，特别是在加热过程中受酸、碱作用，容易发生水解、脱水和异构化等反应，使其生理活性降低，因此在提取时应注意控制适当的温度、酸碱性和抑制酶的活性。 1.原生苷的提取 首先要抑制酶的作用，可用乙醇破坏酶的活性或用硫酸铵等无机盐使酶沉淀除去。药材可直接用70～80%乙醇加热提取。若原料为种子或含脂杂质较多时，须先脱脂后在提取。含叶绿素多时可用稀碱液皂化除去，或用稀醇提取时使叶绿素留在残渣中而不被稀醇提出。将醇提液减压浓缩后，加水过滤，滤液进一步通过铅盐法、氧化镁或活性碳吸附法，得原生苷的总苷。 中性皂苷 2.次生苷的提取（酶解法） 次生苷的提取通常利用药材中的酶自行水解，脱去葡萄糖成次生苷后再进行提取，具体方法：将药材粉末加等量水拌匀湿润后，在30～40℃保持6～12小时进行发酵酶解，然后用乙酸乙酯或乙醇按上述原生苷提取办法进行提取和纯化。亦可先提出原生的苷再进行酶解，酶解完全后再用有机溶剂提取。 3.强心苷的分离和纯化 3.1重结晶法（对浓度较高组分） 3.2逆流分溶法（在两相中分配系数不同） 3.3 层析法 对于亲脂性强的强心苷类，如次生苷可用吸附层析法进行分离。常用吸附剂有硅胶、氧化铝（中性），洗脱剂为苯:甲醇、氯仿:甲醇等混合溶剂， 由于强心苷尤其是原生苷一般极性较大，吸附层析往往分离效果不好，改用分配层析能得到较好的分离效果。常用的支持剂有硅藻土、纤维素，以甲酰胺为固定相，甲酰胺饱和的氯仿、苯或甲酰胺饱和的氯仿:丙酮（4:1）为洗脱剂，对极性较强的苷分离效果较好。 4.提取实例 4.1 铃兰毒苷的提取 4.2 西地蓝的提取 医药用西地蓝是毛花洋地黄苷丙的去乙酰化物，用于急性和慢性心力衰竭、心房颤动等。其能溶于水、甲醇或乙醇，微溶于氯仿。 ⑴提取总苷 ⑵分离苷丙 粗总苷中所含毛花洋地黄苷甲、乙、丙的苷元由于羟基的数目和位置不同，使得它们的极性和溶解度有差异。极性大小顺序为 苷丙 ﹥ 苷乙 ﹥苷甲 ⑶去乙酰基 氢氧化钙或碳酸钾 水解 4.3 黄花夹竹桃 继续分离强心灵（夹竹桃次生苷混合物）成5种单体，可用柱色谱。以中性氧化铝作吸附剂，苯-氯仿（1:1、1:3、1:4）、氯仿、氯仿-甲醇（99.5:0.5、99:1、98:2）、甲醇依次洗脱，合并相同组分，分别用甲醇重结晶，一次得单乙酰黄夹次苷乙、黄夹次苷乙、黄夹次苷甲、黄夹次苷丙、黄夹次苷丁。 ⑴α-羟基糖：除D-葡萄糖、L-鼠李糖外，还有6-去氧糖如L-夫糖（L-fucose）、D-鸡纳糖（D-quinovose）、D-弩箭子糖（D-antiarose）、D-6-去氧阿洛糖（D-6-deoxyallose）等；6-去氧糖甲醚如L-黄花夹竹桃糖（L-thevetose）、D-洋地黄糖等。 ⑵α-去氧糖：有2，6-二去氧糖如D-洋地黄毒糖（D-digitoxose）等；2，6-二去氧糖甲醚如L-夹竹桃糖（L-oleandrose）、D-加拿大麻糖（D-cymarose）、D-迪吉糖（D-digi