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实验十 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 注射激素和取血 计算注射剂量:胰岛素为0.75U/Kg体重,肾上腺素为0.4mg/Kg体重; 皮下注射激素; 注射激素后取血,时间:肾上腺素30min,胰岛素1h(心脏取血); 采血后静置10min至血清析出; 3000r/min离心分离10min,吸取血清至新的EP管中,做好标记。 * * 原理 胰岛素能降低血糖,肾上腺素能升高血糖 给动物注射胰岛素或肾上腺素 取注射前、后兔的静脉血,测定血糖含量 通过公式计算血糖改变百分率 血糖改变%= 注射后BS-注射前BS 注射前BS ×100% 原理 葡萄糖+ O2 + H2O GOD 葡萄糖酸+ H2O2 本实验是葡萄糖氧化酶 (GOD)和过氧化物酶 (POD) 相偶联发生的偶联反应 2H2O2+4-氨基安替比林+酚 POD 红色醌类化合物+H2O 操作步骤 动物准备 注射前取血 注射激素 注射后取血 计算结果 称体重,重的注射胰岛素,轻的注射肾上腺素 已准备 腹部皮下45°注射,不要穿入腹腔内脏 作好标记 防止溶血 测定血糖 加样要准 反应时间一致 505nm比色 取小试管4支,编号,按下表操作: 加入物 (ml) 空白管 标准管 测定前 测定后 血清 - - 0.01 0.01 葡萄糖标准应用液 - 0.01 - - 蒸馏水 0.01 - - - 酶酚混合试剂 1.50 1.50 1.50 1.50 血糖测定 混匀,置37°C水浴中,保温15min,加2.0ml H2O混匀后在波长505nm处比色,以空白调零,测定各管吸光度。 注意事项 1. 腹部皮下注射 ,以45°进针,针头不要刺 入腹腔,更不要穿破皮肤注射到体外。 2. 最后加酶酚混合试剂,各管反应时间应一致。 3. 葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄 糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含 量
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