微生物的实验室培养选修一》.pptVIP

一、基础知识：(一)微生物 朊病毒（蛋白质病毒） 细菌的外形与大小 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。 选择培养基 加入青霉素的培养基 加入高浓度食盐的培养基不加氮源的无氮培养基 不加含碳有机物的无碳培养基 微生物的恒温培养 菌种的保存1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。2、长期保存：甘油冷冻管藏法 本课题知识小结: 四、课题成果评价（一）培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。（二）接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 【典例解析】 例1．关微生物营养物质的叙述中，正确的 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。 答案：D 按培养基的功能（用途）分 鉴别培养基 选择培养基 举例 用途 原理 制备方法 种类 加入某种 化学物质 加入某种 试剂或化 学药品 依据某些微 生物对某些 物质的抗性 依据微生物的 代谢产物与特 定试剂或化学 药品反应，产 生明显的特征 变化 从众多微生 物中分离所 需的微生物 鉴别不同种 类的微生物 加入青霉素 分离得到酵 母菌和霉菌 伊红和美蓝 培养基可鉴 别大肠杆菌 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离金黄色葡萄球菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 （二）培养基 （1）按物理状态分： （2）按功能分： （3）按成分分： 1.培养基的类型 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 选择培养基 鉴别培养基 天然培养基 合成培养基 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 不管哪种培养基，一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求． 3.培养基的成分 碳源： 为微生物提供碳元素。 无机碳化合物——CO2、NaHCO3、CaCO3等 有机碳化合物 糖类（最常用的碳源，尤其是葡萄糖） 烃类、醇类、脂肪酸 蛋白质、脂质、核酸等（有机大分子） 牛肉膏、蛋白胨、花生粉饼、石油（天然） 氮源: N2 NH3等 有机物中的氮 无机氮 牛肉膏、蛋白胨 为微生物提供氮元素。 圆褐固氮菌、硝化细菌和大肠杆菌 氨盐、硝酸盐等是常用的氮源 氮源主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是() A．碳源B．氮源C．无机盐D．特殊营养物质 A （三）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 成功地培养微生物的关键。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 3.常用的消毒与灭菌的方法 能 全部微生物 强烈 灭菌 不能 部分生活状态的微生物 较为温和 消毒 芽孢和孢子能否被消灭 消灭微生物的程度 理化因素的作用强度 比较 项目 （1）日常生活经常用到的是 煮沸 消毒法； （2）对一些不耐高温的液体，则使用 巴氏 消毒法（例如牛奶）； （3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果，然后使用 紫外线 进行物理消毒。 （4）实验操作者的双手使用 酒精 进行消毒； （5）饮水水源用 氯气 进行消毒。 消毒的方法 1、灼烧灭菌 灭菌的方法： 接种环、接种针、试管口等的灭菌 2、干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. 如玻璃器皿、金属用具等的灭菌