2016上海交通大学遗传学实验PPT2唾液腺.pptVIP

实验二 果蝇唾腺染色体的观察 一、实验目的 1 观察认识果蝇唾腺染色体 2 学习解剖果蝇三龄幼虫的唾腺及唾腺染色 的制片方法 二、实验原理 剖取果蝇唾腺细胞进行制片观察，可见到一个由4对染色体着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的5条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第4对染色体为粒状，与染色中心密切相联，总称为唾腺染色体。 果蝇的唾腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。 其中第4对染色体为粒状，与染色中心密切相联，总称为唾腺染色体 一个由4对染色体着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的5条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R）， 1881 年意大利的细胞学家巴尔比尼 (Balbiani) 在双翅目昆虫摇蚊 ( chironmus ) 幼虫的唾液腺细胞间期核中发现了一种巨大染色体。由于存在于唾液腺细胞，所以又称为唾液腺染色体。 1933 年美国学者贝特恩 (Painter) 等又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾液腺细胞核中发现了巨大染色体。 果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的 DNA 多次复制，但细胞、细胞核不分裂。 复制后的染色单体 DNA 不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般体细胞中的染色体粗 果蝇唾腺染色体特征 1 典型的多线染色体。它是果蝇睡腺细胞核内有丝分裂所致，即核内染色体中的染色线连续复制而染色体并不分裂. 巨型染色体: 染色线可多达500-1000条，其长度和体积分别比其它细胞的染色体长100-200倍、大1000-2000倍 3 横纹特征: 由于每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，因而出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。不同物种染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的。 4 可以结合遗传实验结果进行基因定位,易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。 三、实验材料 黑腹果蝇的三龄幼虫活体 Drosophila melanogaster 幼虫：一龄（24小时）→二龄（24小时）→三龄，三龄体长4-5mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 四、实验用具及试剂 1，用具： 解剖镜、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、 解剖针、吸水纸。 2，试剂： 0.9%生理盐水，1mol/L盐酸、1%醋酸洋红染色液 五、实验步骤-取唾液腺 1， 选取发育良好、虫体肥大的三龄幼虫，置于载玻片上，1滴生理盐水； 2，在双筒解剖镜下左手持镊子压住虫体中后部，右手持解剖针按住头部（即口器销后处），轻轻向前拉动，使头部扯离虫体，从而拉出唾腺。 3，这时可看到一对透明微白的长形小囊，即是由单细胞层构成的唾腺，在解剖镜下隐约可其细胞界限； 4，唾腺的一侧有一条泡沫状脂肪体，可用解剖针剔除。 . 选取发育良好、虫体肥大的三龄幼虫，置于载玻片上，加1生理盐水，在双筒解剖镜下左手持镊子压住虫体中后部，右手持解剖针按住头部（即口器销后处），轻轻向前拉动，使头部扯离虫体，从而拉出唾腺。 这时可看到一对透明微白的长形小囊，即是由单细胞层构成的唾腺 唾腺的一侧有一条泡沫状脂肪体，可用解剖针剔除 制片及镜检 1，解离：加1滴1mol/L盐酸，放置3分钟； 2，染色：加1滴1%醋酸洋红染色15-20min。 3，压片： 盖上盖玻片，用拇指在盖玻片上适当用力压片，注意勿使盖玻片移动 。 4，镜检 六、实验结果 绘制你所看到的图象 本实验制片质量为课堂成绩