微生物复习题2..docVIP

卫生微生物检验 1、卫生指示菌的定义、目的、类型 定义：指示菌（指标菌）是指在常规卫生监测中，用以指示检品卫生状况及安全性的指示性微生物。 目的：主要是以卫生指示菌在检品中存在与否以及数量的多少为依据，对照国家卫生标准，对检品的饮用、食用或使用的安全性做出评价。 类型：有三类，一般卫生（菌落总数、霉菌和酵母菌数）指示菌、粪便污染（大肠杆菌和大肠菌群）指示菌和其他（如特定菌、某些致病菌或其他指示性微生物）指示菌。 2、一般卫生状况指示菌的定义 a菌落总数：菌落总数是指被检样品的单位重量（g）、容积（ml）、表面积(cm2)或体积(m3)内，所含有的能在某种培养基上经一定条件培养后生成的细菌菌落总数。 b霉菌和酵母菌数：霉菌和酵母菌数是指检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数。 3、一般卫生状况指示菌卫生学意义 评价被检样品的一般卫生质量、污染程度以及安全性。 4、一般卫生状况指示菌选择标准 （1）易于检出。（2）方法简单。（3）有一定的代表性。 5、粪便污染指示菌类别 包括3种：大肠杆菌和（粪）大肠菌群；肠球菌；亚硫酸盐还原梭菌。 6、大肠杆菌的定义 大肠杆菌：以具有β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶为特征，具有发酵乳糖产酸产气，分解色氨酸产生吲哚等生化特点。 7、大肠菌群（总大肠菌群）的定义 指一群能在35℃--37℃条件下24—48h内发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的G-无芽孢杆菌。 8、大肠菌群包括4个属 埃希氏菌属（大肠杆菌）、柠檬酸杆菌属（弗劳地枸橼酸杆菌）、克雷伯氏菌属（肺炎克雷伯氏菌）、肠杆菌属（阴沟肠杆菌和产气肠杆菌）。 9、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）的定义 即能在44℃--45℃发酵乳糖的大肠菌群。 10、为什么大肠杆菌作为粪便污染的指示菌意义最大 大肠杆菌在人和动物粪便中大量存在，是理想的粪便污染的指示菌。粪大肠菌群其主要菌属与大肠菌群相同，但以埃希氏菌属为主，其余3属因不适合在此温度下生长而占很少数量。总大肠菌群所包含的菌种可以在人、畜粪便中检出，也可以在营养丰富的水体、土壤、腐败的植物等外环境中检出，即在没有粪便污染的的情况下，也有检出符合上述定义细菌的可能。 11、肠球菌的意义 肠球菌也是人及动物肠道的正常菌群，在自然界分布广泛，常存在于水、土壤、空气中，在人粪便中数量少于大肠杆菌，主要栖居于动物肠道内，常作为动物粪便污染的指示菌。主要代表菌为粪肠球菌。 12、亚硫酸盐还原梭菌的意义 代表种为产气荚膜梭菌，是人和动物特别是食草动物肠道内常住菌，数量少于大肠杆菌。特点是厌氧生长、能形成芽孢、能还原亚硫酸盐为硫化物。抵抗力强，在外环境中能存活较长时间，常作为陈旧性粪便污染的指标，可与大肠菌群互补监测。 13、粪便污染指示菌选择标准 a是人及温血动物肠道正常菌群的组成部分，而且在数量上占有优势； b在被人或动物粪便污染的样品中易检出，未被粪便污染的样品中无此种菌存在； c排出体外后，在外环境中存活时间与肠道致病菌大致相似或稍长； d如作为饮用水的指示菌，对氯的抵抗力应不低于肠道致病菌或略强，而且进入水中不会再繁殖； e检验方法简便，易于检出和计算。 14、常用的六种致病菌的指标菌是什么 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌通称绿脓杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、链球菌和破伤风梭菌。 15、菌落总数检验程序 1）样品处理 2）做成几个适当倍数的稀释液 3）选择2-3个适当稀释度各取1mL分别加入灭菌培养皿内 4）每个培养皿加入适量的营养琼脂，36±1℃培养48±2h 5)菌落计数 6)报告 16、菌落总数计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 17、菌落总数结果报告 菌落数在100以内时,按其实有数报告,大于100时,采用两位有效数字(4舍5入)报告,也可用指数来表示。 18、大肠菌群检验程序 1）样品稀释 2）接种乳糖胆盐发酵管，36±1℃培养24±2h→不产气报告结果 3）产气→分离伊红美篮琼脂平板→革兰氏染色阳性→报告 4）革兰氏染色阴性→乳糖发酵管复发酵→不产气报告结果 5）乳糖发酵管复发酵产气→报告结果 19、大肠菌群结果报告 根据证实为大肠菌群阳性管数，查MPN检索表，报告100mL（g）大肠菌群MPN值。 20、沙门氏菌检验程序 1）样品处理 2）前增菌（鲜肉、鲜蛋、鲜乳或未加工食品可省略此步） 3）直接增菌（接种MM和SC分别42℃和36±1℃培养） 4）分离平板（分离于BS和DHL或HE、WS、SS） 5）挑取可疑菌落接种TSI（三糖铁） 6）生化鉴定（生化不符合时报告结果） 7）血清学分型鉴定 8）报告 22、志贺氏菌检验程序 1）增菌 2）分离平板 3）挑可疑菌落接种T