食品检测实验于方案设计.docVIP

钙测定．仪器与试剂 1）原子吸收分光光度计 2）盐酸，硝酸，浓硫酸 3）2％氧化镧溶液：称取20g氧化镧（纯度大于99．99％），加75ml盐酸于1000ml容量瓶中，加去离子水稀释至刻度。 4）钙标准溶液：精确称取g碳酸钙（纯度大于99．99％），加5ml去离子水，加盐酸溶解，移入100ml容量瓶中，加2％氧化镧稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶内4℃保存，此溶液每毫升相当于500ug钙。 5）钙标准使用液：取钙标准液5ml于100ml容量瓶中，用2％氧化镧稀释至刻度，贮存于聚乙烯瓶中，4℃保存，此溶液每毫升相当于25ug钙。 ．操作步骤 3.1用水清洗干净后，用去离子水充分洗净。取样后立即装容器密封保存，防止空气中的灰尘和水分污染。 3.2精确称取于凯氏烧瓶中，加10mL硝酸和5mL浓硫酸，加热消化样品。先于350直至冷却后呈无色为止。加2毫升去离子水，加热至400以除去多余的硝酸。待凯氏烧瓶中的液体接近4～5ml时，取下冷却。用少量去离子水洗并转移于的容量瓶中，加2％氧化镧溶液定容至刻度。 取与消化样品相同量的混合酸消化液，按上述操作做样品空白溶液。3.3 测定 3.3.1标准曲线制备：分别取钙标准使用液1、2、3、4、6ml，用2%氧化镧溶液定容至50ml，即相当于0.5、1、1.5、2、3ug/ml。 3.3.2测定条件：仪器狭缝、空气及乙烯的流量、灯头高度、元素灯电流等均按使用的仪器说明调至最佳状态。 3.3.3将消化好的样品溶液、样品空白溶液、钙标准溶液、钙标准溶液空白（为2％氧化镧）分别导人火焰进行测定。 维生素C测定 仪器.1 实验室常用设备。.2 荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。.3 搅拌机。 试剂 本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。.1 偏磷酸－乙酸溶液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，加温搅拌溶解，冷却后定容至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。.2 0.15mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。.3 偏磷酸－乙酸－硫酸溶液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同（.1）配制。.4 50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。.5 硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml 50%乙酸钠溶液（.4）中。临用前配制。.6 邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。.7 抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）（临用前配制）：准确称取50mg抗坏血酸，用偏磷酸－乙酸溶液（.1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。.8 抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）：取一定量抗坏血酸标准溶液（1mg/mL），测定其pH值，如果pH2.2，则取10mL抗坏血酸标准溶液，用偏磷酸－乙酸溶液（.1）定容至100ml；如果pH＞2.2时，则取10mL抗坏血酸标准溶液用偏磷酸－乙酸－硫酸溶液（.3）定容至100mL。.9 活性炭的活化：加0g炭粉于ml盐酸（1+9）中，加热回流1～2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110～120℃烘箱中干燥，备用。 操作步骤 .1 样品制备：称取100g，加100g偏磷酸-乙酸溶液，加g偏磷酸-乙酸溶液用pH计测定其pH值，如果pH值1.2，则取适量匀浆（）于100mL容量瓶中，用偏磷酸-乙酸溶液定容；若pH值＞1.2，则用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液定容。混匀，取上清液备用。.2 氧化处理：分别取离心后的样品液样品液及标准使用液各100ml于带盖三角瓶中，加2g活性炭，用力振摇1min，过滤，弃去最初数毫升滤液，分别收集其余全部滤液，待测定。.3 各取10ml标准氧化液于2个100ml容量瓶中，分别标明“标准”及“标准空白”。.4各取10ml样品液样品液于2个100ml容量瓶中，分别标明“样品”及“样品空白”。.5 于“标准空白”及“样品空白”溶液中各加5ml硼酸-乙酸钠溶液，混合摇动15min，用蒸馏水定容，在4℃冰箱中放置2～3h，取出备用。.6 于“标准”及“样品”溶液中各加入5ml 50%乙酸钠溶液，用蒸馏水定容，备用。.7 制备标准系列：取上述“标准”溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）0.5、1.0、1.5和2.0ml，取双份分别置于10ml带盖试管中，加水补充至2.0ml制成标准系列。以后操作同下列荧光反应。 .8 荧光反应：取“标准空白”溶液，“样品空白”溶液及“样品”溶液各2ml，分别置于10ml带盖试管中。在暗室中迅速向各管中加入5ml邻苯二胺，振摇混合，在室温下避光反应35min，于激发光波长338nm、发射光波长420nm处测定荧光强度。以标准