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酶催化基本理论 制药工程系 李慧敏 生物反应过程是利用生物催化剂以完成生物技术产品生产的过程。 概述 酶是微生物等生物细胞生产的具有生物催化活性的蛋白质； 优点：专一性；高效性；反应条件温和； 缺点：容易变性失活，易被杂菌污染 本节内容 一、单底物酶促反应动力学 二、影响酶活性的环境因素及稳定性 三、固定化酶反应的特性变化 四、固定化酶反应器 五、固定化酶在生物制药生产中的应用举例 一、单底物酶促反应动力学—米氏方程 单底物酶促反应 实际反应中，由于存在底物或者抑制剂的抑制会降低酶反应速率。 （一）、底物抑制 （二）、抑制剂抑制 （一）底物抑制的酶反应方程 （二）抑制物抑制的酶反应方程 二、影响酶活性的环境因素及稳定性 1.温度 在适宜的温度范围内，酶反应速率基本符合阿伦尼乌斯定律，即 2.pH 每种酶都有适宜的pH值范围，并且有最佳的pH,在此pH下，酶催化反应速率达到最大 三、固定化酶反应的特性变化 定义：固定化酶就是把游离酶经过处理约束限制在一固定空间或载体上形成的酶。 酶固定化的方法可以分为四类： （1）包埋法 （2）吸附法 （3）交联法 （4）共价法 主要变化如下： （1）酶活力的改变：活性降低 （2）稳定性提高 （3）最适宜作用温度的改变 （4）最适pH值的改变 （5）反应动力学常数的改变 （6）相对酶活力与半衰期 四、固定化酶反应器与游离酶反应器 （一）游离酶反应器 A.机械搅拌反应器（分批、半连续和连续操作） B.超滤膜反应器（连续操作或间歇循环操作） 固定化酶反应器 多种型式： 搅拌罐、固定床或填充床、流化床、膜式。 五、固定化酶在生物制药生产的应用举例 利用固定化青霉素酰化酶催化天然的青霉素G或V生产6-氨基青霉烷酸（进一步合成氨苄青霉素） 利用固定化氨基酰化酶处理含有L型和D型的外消旋氨基酶混合物（制备纯的L-氨基酸） * 生物催化剂 微生物、植物 的整体细胞 从细胞中提取 出来的酶 酶 溶菌酶 酶 底物 复合物 产物 假设【S】≧【E】, 【ES】不变 米氏方程 产物的生产速率 关键是求取Km和υmax的值 最佳pH值 酶 游离酶 固定化酶 难以回收，增加成本 生产中常常采用 固定化酶 机械搅拌反应器 超滤膜反应器 侧置膜超滤系统 不锈钢搅拌罐 玻璃钢搅拌罐 电加热搅拌罐 *