气相色谱质谱法测定水发食品中的甲醛班级.pptVIP

* * 气相色谱质谱法测定水发食品中的甲醛 班 级：应011-2 姓 名：徐红艳 指导教师：张 强（高级实验师） 返回 上一张 下一张 结束放映 1　引　言 甲醛常用作消毒剂，防腐剂等，它是一种原生质毒物,接触后即发生皮肤和粘膜强烈刺激作用，对人体细胞功能损害较大,甚至可能致癌。同时对记忆力，注意力等神经行为功能也有影响。次硫酸氢钠甲醛俗称吊白块或雕白粉,分子式为NaHSO2·CH2O·2H2O ,可释放出甲醛。甲醛和吊白块能改善食品的感观性状,具有漂白、防腐的作用。近年来不法商贩为获利,将吊白块或甲醛作为防腐剂加入到水发食品中。国际上把甲醛列为能引起癌症的物质。 返回 上一张 下一张 结束放映 返回 上一张 下一张 结束放映 目前测定甲醛的经典方法是分光光度法,该法简单、快速，但易受酚、SO2以及其它醛、胺的干扰,容易造成假阳性。GC 法由于甲醛分子太小,直接进GC 分析时出峰太快,且在FID 检测器无响应;LC 法也因甲醛极性太大而与溶剂峰同时流出,而且在紫外无吸收无法检测。因此食品中甲醛的测定一般先将甲醛衍生,再用GC 或LC 法进行测定,但仍因食品基体复杂而常受到干扰,也易造成假阳性结果。 返回 上一张 下一张 结束放映 本研究采用选择性离子检测(SIM) 对水发食品中甲醛进行GCMS 测定,消除了食品中复杂基体的干扰,提高了选择性和准确度,该法目前未见报道。同时,对样品提取方法作了改进,直接超声提取而无需将甲醛蒸馏出来,简化前处理过程,缩短分析时间,较已有方法简便快速,适应性广。 返回 上一张 下一张 结束放映 2 原 理 2,4-二硝基苯肼（2，4-DNPH）作甲醛的捕集剂,可与甲醛反应,脱去一分子水,形成2,4-二硝基苯腙，此反应是不可逆的,反应式如下: 返回 上一张 下一张 结束放映 3　实验部分 3.1 　仪器与试剂 GCMS2010 气相色谱/质谱联用仪(日本岛津公司) ，超声波发生器。 甲醛标准溶液:取含量为36 %～38 %的甲醛(A.R) ,标定其准确浓度后,用水配制成1 g/ l 标准储备液,置于冰箱内可保存三个月,使用时再逐级稀释成所需浓度。 衍生试剂:称取1.0 g 2 ,4-二硝基苯肼(2 ,4-dinitrophenyldrazine ,DNPH ,分析纯,中国医药集团上海试剂公司),加120ml浓HCL,配制成2g/l的衍生试剂,置于棕色瓶中,此溶液可保存三个月。二氯甲烷、盐酸均为分析纯。 返回 上一张 下一张 结束放映 3.2 样品提取 取适量购自海产品市场的水发虾仁,粉碎后,称取5. 0 g (精确至0.1mg),加水溶解定容至50ml,密封。超声波振荡提取20min,离心取上层清液备用。 3.3 衍生 取20ml液体样品或固体样品提取液,加2mlDNPH衍生试剂,混合均匀,避光衍生6h。标准溶液与样品同时进行衍生。衍生产物2 ,4-二硝基苯腙用2ml二氯甲烷萃取。 返回 上一张 下一张 结束放映 3.4 　GCMS测定 3.4.1 　GC条件　色谱柱: DB-5(30m×0.25mm×0. 33μm) 弹性石英毛细管柱,160℃10℃/min240℃(5min) 。载气(He),柱前压40KPa,分流比10∶1,溶剂延迟2min,进样量为1μl 。 3.4.2 　MS条件　EI离子源,电子能量70eV ,离子源温度200℃,电子倍增器电压2300V,GCMS接口温度250℃,选择离子检测(SIM)m/z 79、210。甲醛标样衍生物的气相色谱质谱总离子流图见图1。 返回 上一张 下一张 结束放映 图1 　甲醛衍生物的总离子流色谱图 1：总离子流 2：m/z=79.00 3:m/z=210.00 2 1 3 (t) (Inten) 返回 上一张 下一张 结束放映 4 结果与讨论 4.1 超生波提取时间的选择 选择一定含量的样品在超声波振荡器中进行样品的提取，实验了提取时间分别为10min﹑15min﹑20min﹑ 30min﹑40min对测定结果的影响。实验表明，当提取时间超过20min时测定的峰面积变化不大。因此，我们选择超生波提取时间为20min。 返回 上一张 下一张 结束放映 4.2　衍生条件的优化 4.2.1 　衍生剂用量的影响　衍生剂DNPH 用量过大会吸附于色谱柱上,对色谱柱造成损伤；DNPH 用量过小将导致甲醛衍生不完全。实验了DNPH用量为1.0ml、2