清香大曲及醅中地衣芽孢杆菌的分离鉴定.docVIP

清香大曲及酒醅中地衣芽孢杆菌的分离鉴定 芽孢杆菌是大曲中常见微生物，也是重要类群之一。地衣芽孢杆菌一直以来被认为是酱香型白酒高温大曲中特有的微生物，就我们研究发现，在牛栏山酒厂生产用的多种清香大曲、出池酒醅中同样存在地衣芽孢杆菌，对分离出23株芽孢杆菌进行生理生化实验，鉴定出12株地衣芽孢杆菌，鉴定结果与中国食品发酵工业研究院分子鉴定结果一致。本文主要介绍地衣芽孢杆菌的生理生化鉴定实验方法，为地衣芽孢杆菌的鉴定提供比较完备的一套方法。1 地衣芽孢杆菌的分离1.1材料牛栏山酒厂生产用清香大曲、酿酒车间酒醅1.2分离用培养基肉汁培养基：牛肉膏0.3％，蛋白胨1.0％，NaCl 0.5％，琼脂2.0％，pH 7.0-7.2，121℃，灭菌30min。1.3分离方法取大曲干粉或酒醅0.5g，加入带有玻璃珠的无菌水三角瓶中，摇床培养30min，60℃水浴30min，然后用接种环蘸取，在肉汁培养基平板上划线分离。挑取单菌落继续划线分离，直到得到单菌落纯菌株为止。2 地衣芽孢杆菌生理生化鉴定实验根据上述分离培养基和分离方法，共计分离得到芽孢杆菌23株，编号分别为1＃、2＃、3＃、4＃……22＃、23＃，接下来通过实验对这些菌株进行筛选和鉴定。地衣芽孢杆菌鉴定参考《伯杰氏细菌鉴定手册》及《常见细菌系统鉴定手册》（东秀珠，蔡妙英等编著）的方法，有所改进，以下为具体的生理生化实验鉴定