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2011-09-20 承担单位：福建省农科院试验项目：试验人员：试验负责：报告日期：20-09-30 计数月份：20年月 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 （0.9-1.0） 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计，实施实验，记载，分析清晰，结论清晰文献完整，发表水平 福建省农业科学院农业生物资源研究所 农业微生物研究中心 电话: 0591 传真: 0591 1．试验目的 酶是土壤生态系统代谢的一类重要动力，土壤中所进行的一切生物学和化学过程都要有酶的催化作用才能完成[1]，不同的酶具有不同的催化功能[2]。土壤酶活性可以表征土壤生产力和土壤肥力水平[3,4]。土壤酶活性可用作土壤微生物的活性指标(Bergstrometal.，1998)，是土壤生物学重要特征之一。土壤酶是参与土壤新陈代谢的重要组成部分，它可来自于微生物细胞，也可来自于动物残体。土壤中的酶与微生物细胞一起推动着物质转化，并且土壤酶在碳、氮、硫、磷等各元素的物质循环中起着重要作用，特别在有机残体分解和无机化合物转化的初始阶段，土壤酶的作用尤为突出。土壤酶活性已成为评价土壤肥力、土壤质量及土壤健康的重要指标。 本文对福安市不同产量、不同施肥方式下葡萄园的脲酶活性进行分析比较，以期为创造适宜的土壤营养条件，科学地协调土壤与葡萄生态系统之间的关系，合理地利用土壤，提高土壤肥力，实现葡萄栽培的可持续发展，为福安市葡萄的合理化栽培并形成产业优势提供科学依据。 2．试验方法 2.1 供试材料 2011年7月底，采集自福安的葡萄园土壤，具体信息见表1。葡萄园土壤包括不同产量、施肥方式下的土壤，以及丰产树的土壤、夏里的正常和不正常土壤。 表1 葡萄园土壤的信息 编号 产量 施肥方式 1号 丰产树 —— 2号 3 kg/株 沟施 3号 4 kg/株 撒施 4号 5 kg/株 撒施 5号 5 kg/株 沟施 6号 4 kg/株 沟施 7号 CK —— 8号 夏里正常土壤 —— 9号 夏里不正常土壤 —— 10号 3 kg/株 撒施 2.2.主要试剂和溶液 甲苯、尿素、柠檬酸、氢氧化钾、苯酚钠、甲醇、丙酮、乙醇、氢氧化钠、硫酸铵、酪素、硫酸、硫酸钠、茚三酮、甘氨酸、蔗糖、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、3, 5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、葡萄糖、邻苯三酚、乙醚、重络酸钾均为国产或进口分析纯试剂柠檬酸盐缓冲液：分别称取368 g柠檬酸溶于600 mL蒸馏水，295 g氢氧化钾溶于1000 mL蒸馏水，将两溶液合并，用1 mol/L NaOH将pH调至6.7，用蒸馏水稀释至2000 mL； 苯酚钠溶液：①将62.5 g苯酚钠溶于少量乙醇，加2 mL甲醇和18.5 mL丙酮，用乙醇稀释至100 mL，②27 g NaOH溶于100 mL蒸馏水，4 ℃冰箱保存，使用前取两溶液各20 mL混合，用蒸馏水稀释至100 mL； 次氯酸钠溶液：用蒸馏水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定； g NH4SO4溶于水，稀释至1000ml（1ml含100ug氮）,分别取10ml、25ml、40ml、60ml、75ml、90ml于500ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，并在酶标仪上于 578nm处进行比色，比色后以光密度值为纵坐标，氨态氮量浓度为横坐标，绘制标准曲线。 （8）结果计算，以每百克的NH4+-N的毫克数表示土壤的脲酶活性，其计算式为 土壤脲酶活性[mg NH4+-N/(100g干土·3h)]=(C×V)/dwt。 式中，C为滤液中（μg/mL）；V为滤液的体积（mL）；dwt为烘干土重量（g）数据的统计分析 数据经Excel 2003整理后，用数据处理系统对进行LSD检验。 3．试验结果 3.1土壤中脲酶的标准曲线的建立 为测定土壤中脲酶的活性，需要配制标准曲线，即测定不同氨态氮量在酶标仪上于 578nm下的光吸收值，具体见表2，制作的标准曲线见图1，可得土壤中脲酶标准曲线为y = 0.0003x + 0.0316 （R2 = 0.9295）。 表2 不同氨态氮量的光吸收值 氨态氮量浓度（ug/ml） UV578nm 一 二 三 平均值 2 0.033 0.031 0.032 0.032 5 0.034 0.031 0.036 0.034 8 0.033 0.035 0.034 0.034 12 0.031 0.04 0.034 0.035 15 0.037 0.038 0.037 0.037