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微生物的遗传变异与育种 第二节 基因突变与诱变育种 一、基因突变: (一)突变类型: 温度敏感型突变 (二)突变的特点: 1)不对应性:环境与变异无对应性 2)自发性:非人为的诱变因素下发生 3)稀有性:生物体的自发突变率为10-10~10-12 4)独立性:一个基因的突变对其它基因突变无 影响 5)诱变性:诱变剂可提高突变率10~105倍 6)稳定性:突变性状稳定、可遗传 7)可逆性:有回复突变 二、突变与育种 (一)自发突变与生产育种 (二)诱变育种 1. 概念: 诱变育种是用物理或化学的诱变剂使诱变对象内的遗传物质(DNA)的分子结构发生改变,引起性状变异并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。 2. 诱变剂: 2)种类: 物理因子(phisical agents) 化学因子(chemical agents) 转座子(transposable elements) 物理诱变剂:U.V、χ、γ、快中子、超声波等。 化学诱变剂: 氮芥、硫酸二乙酯、亚硝基胍、NTG、叠氮胸腺嘧啶(AIT)、吖啶类染料等; Ames test:对化学诱变剂做检测 菌种:鼠伤寒沙门氏菌his-;组氨酸营养缺陷型,对诱变剂敏感。 原理:利用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌his-易回复突变的性能; 突变菌株(his-)在基本培养基上不长;而发生回复突变则能够生长。 Ames test 方法示意图 第三节 基因重组 原核生物的基因重组 真核生物的基因重组 基因重组: 把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起,经遗传物质重新组合后,形成新遗传型个体的方式。 一、原核生物的基因重组 (一)转化(transformation) 转化的全过程(以噬菌体为例) (二)转导(transduction) 以噬菌体为媒介,把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象,称为转导。获得新遗传性状的受体细胞,称转导子。 (三)接合(conjugation) 供体与受体细胞直接接触,借性菌毛传递大段DNA的过程。在受体细胞中发生交换、整合,使之获得供体菌的遗传性状的现象,称为接合。通过接合而获得新性状的受体细胞就称接合子。 (四)原生质体融合(protoplast fusion) 使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合,并发生遗传重组以产生融合子(fusant)的过程。 过程: 二、真核微生物的基因重组 (二)准性杂交(parasexual hybridization) 同种异株的两个体细胞融合,不经减数分裂而导致低频基因重组发生的一种繁殖方式。(单倍体体细胞重组) 3. 过程 1)菌丝联结(anastomosis); 2)形成异核体(heterocaryon); 细胞质、核交流形成异核菌丝体。 3)核配(caryogamy)形成杂合二倍体; 特点:频率低,10-5~10-7 促成:樟脑熏蒸、紫外、高温 4)体细胞交换和单倍体化 微生物菌种保藏的原理是在低温、干燥、隔绝空气和断绝营养等环境条件下, 是菌体处于代谢不活跃状态。 * * 第七章 细胞形态 形态突变型 菌落形态 营养缺陷型 生化突变型 抗性突变 抗原性突变(包括细胞内部、表面成分的 改变) 致死性突变型(合成关键性酶的基因发生了突变,则表现 出致死突变) 条件致死突变型:如突变为温度敏感型(37℃死, 25℃ 活) 其它突变型:毒力突变、糖发酵突变、产量、产品突变等 按表型分 1.生产选育:群体培养中个别的变异个体表现出 生长优势,发现突变种后,随时分离、纯化。 2.定向培育:用特定的环境长期处理某一微生物 群体,同时不断对其移种、传代,以达到积累 和选择合适的自发突变 体的一种育种方法.
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