吴怡慧-项目四香菇多糖的生产.pptxVIP

预习方案汇报PPT项目四 香菇多糖的生产姓名：吴怡慧班级：生物制药1411指导老师：彭加平 韦平和1香菇多糖的基本知识2目录香菇多糖的生产工艺3香菇多糖的分析检测4注意事项 参考文献01Part One香菇多糖的基本知识1、香菇多糖的简介2、香菇多糖的性质3、香菇多糖的作用香菇多糖的简介香菇多糖(1entinan，LNT) 香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分，是香菇的主要有效成分，是一种宿主免疫增强剂(host defense potentiator，HDP)，是一种非特异性免疫刺激剂。具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能（T细胞促进作用)；香菇多糖中的活性成分是具有分支的β— (1—3)—D—葡聚糖，主链由β—(1—3)—连接的葡萄糖基组成，沿主链随机分布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基，呈梳状结构；香菇多糖与其他抗肿瘤药物相比，香菇多糖几乎无任何副作用，是目前已知最强的免疫增强剂之一。到目前为止，香菇多糖仍是从香菇子实体中提取，香菇子实体生长周期长，受环境条件的影响与限制、产量低，从而导致香菇多糖的生产成本高，价格昂贵。香菇多糖的性质香菇多糖是一种以β-D(1→3)葡聚糖残基为主链，侧链为(1→6)葡聚糖残基的葡聚糖；香菇多糖为灰白色粉末，大多为酸性多糖，溶于水、稀碱，尤其易溶于热水，不溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，其水溶液呈透明黏稠状；香菇的主要成分是多糖类和不饱和脂肪酸，经热水提取的香菇多糖可调节人休内有免疫功能的T细胞活性，可降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力；香菇还含有双链核糖核酸，能诱导产生干扰素，具有抗病 毒能力。香菇多糖的作用香菇多糖具有免疫调节和抗肿瘤的作用：香菇多糖对调节人体免疫功能的 T细胞有促进作用，刺激抗体的形成和活化巨噬细胞，降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力，故对癌细胞有强烈的抑制作用；在人体中，香菇多糖能增加DNA的合成和外周单核细胞免疫蛋白的产生。香菇多糖的护肝解毒作用：香菇多糖可显著降低ＣＣ l4，硫代乙酰胺和强的松龙引起的ＡＬＴ升高，并可拮抗ＣＣl4肝损伤肝糖元含量降低，具有保肝解毒作用；香菇还含有双链核糖核酸，能诱导产生干扰素，具有抗病毒能力。香菇提取物具有抗血小板凝集作用。02Part Two香菇多糖的生产工艺1、生产原理2、生产准备 3、生产工艺流程 4、补充萃取的操作香菇多糖的生产原理本实验主要采用传统的热水浸提法。中性多糖常用水作溶剂来提取，可以用水浸煮；香菇中色素较高，活性炭有脱色素、脱去异味等作用；香菇子实体有含量较多的脂类的物质，可以用石油醚、乙醚等低级性溶剂除去脂溶性杂质；蛋白质不溶于氯仿等有机溶剂，可对香菇多糖进行除去杂蛋白。而香菇多糖在氯仿中溶解度大于在热水中的溶解度，所以可以用氯仿对香菇多糖进行萃取；乙醇沉淀法提取多糖时，乙醇的浓度及提取方式对多糖的得率影响较大。最有效的方法是向多糖溶液中加入乙醇，使乙醇的最终浓度依次达到40%、60%、70%、80%，离心每次沉淀，乙醇沉淀得到的不一定是纯的多糖，还需用凝胶柱色谱进行分离纯化。香菇多糖的生产准备材料与试剂仪器与器材组织捣碎机 容量瓶 试管恒温水浴锅 烧杯 紫外检测仪循环水式真空泵 记录仪 流量泵冷冻离心机凝胶柱紫外分光光度计脱脂棉原料:香菇试剂：活性炭 氯仿 无水乙醇 丙酮 乙醚香菇多糖的生产工艺流程热水浸提法：称取香菇10g,于组织捣碎机内粉碎，倒入烧杯中，加20倍量的水，将烧杯放入恒温水浴锅中（90℃）加热30min,然后用布氏漏斗和真空泵进行抽滤，取滤液；脱色除味：在滤液中加入活性炭（1mg/ml），搅拌吸附1h，抽滤，取滤液；除杂蛋白：在滤液中加入氯仿溶液，充分混合后，过滤，取滤液。重复萃取、除杂3次；乙醇沉淀：在萃取液中加入无水乙醇，使其乙醇浓度达80%，沉淀12h,于冷冻离心机（ 4000/min）离心30min，取沉淀；脱脂：沉淀物分别用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤3次，即得香菇多糖提取物。萃取的操作 向待分离溶液（料液）中加入与之不相互溶解（至多是部分互溶）的萃取剂，形成共存的两个液相。利用原溶剂与萃取剂对各组分的溶解度（包括经化学反应后的溶解）的差别，使它们不等同地分配在两液相中，然后通过两液相的分离，实现组分间的分离。如碘的水溶液用四氯化碳萃取，几乎所有的碘都移到四氯化碳中，碘得以与大量的水分开。 多糖纯化： 取上述香菇多糖提取物溶于蒸馏水中，离心除去不溶物，按照项目三SephadexG50凝胶装好柱，用蒸馏水平衡48h（控制好流速：4滴/min），然后将上清液上柱分离，用蒸馏水洗脱，洗脱速度5ml/min（可用恒流泵控制洗脱速度）冷冻干燥得白色香菇多糖，并称重。碱提取法大致步骤：香菇粉碎 碱液提取 清液 浓缩 醇析 沉淀K;L