第三单元紫外可见分光光度法课件.ppt

----物质对光的选择性吸收 紫外-可见吸收光谱曲线：A-λ曲线。 有色化合物在溶液中受酸度、温度、溶剂等的影响，可能发生水解、沉淀、缔合等化学反应，从而影响有色化合物对光的吸收。需严格控制。 (1)拿：手捏比色皿毛玻璃面，不碰色皿的透光面，以免沾污。 (2)不得将光学面与硬物或脏物接触。 (3)测定有色溶液吸光度时，一定要用有色溶液润洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。 (4)盛装溶液时，高度为比色皿的4/5处即可。 (5)比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干，以保护透光面。 (6)凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液，不得长期盛放在比色皿中。 (7)不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤。 比色的正确使用方法 2011-02 Instrumental Analysis * 检测器：检测透过吸收池的光信号，并将光信号转变成可测量的电信号。在简易型可见分光光度计中，使用光电池或光电管做检测；中高档紫外可见分光光度计常用光电倍增管做检测器。 检测系统 d. 光电池 光电倍增管 光二极管阵列检测器 记录显示装置：包括放大器和结果显示装置 早期：表头读数 20世纪70年以来：数字读出装置 现代：有自动记录和数字显示装置 如有计算机屏幕显示、配备打印机等 精密度、自动化程度高，功能增多 显示器 e. 2011-02 Instrumental Analysis * 2.2 紫外-可见分光光度计的类型 2011-02 Instrumental Analysis * 缺点：电源波动影响较大，误差大，操作麻烦，不适合定性。 2011-02 Instrumental Analysis * 特点：补偿光源和检测系统不稳定，精密度、准确度较高，结构复杂，价格昂贵。 2011-02 Instrumental Analysis * 将不同波长的两束单色光快速交替通过同一吸收池后达检测器-无需参比池 检测器显示试液在这两束波长的透射比差值或吸光度差值。 特点：可降低杂散光，光谱精度高。（多菌灵） 三种不同类型分光光度计比较 干扰及消除 显色反应选择 显色条件选择 3.1显色反应及显色条件的选择 3.2 吸光度测量条件的选择 A读数范围 入射波长 参比溶液 3 测量条件的选择 显色剂 这种被测元素在某种试剂的作用下，转变成有色化合物的反应叫显色反应，所加入试剂称为显色剂。 3.1 显色反应及显色条件的选择 3.1.1 显色反应的要求 反应定量：被测组分和生成物质之间的关系确定 选择性好 灵敏度高：成物的ε要大，达103～105 生成物稳定，组成要恒定 无干扰：显色剂在测定波长处无明显吸收 对比度：生成物与显色剂的?max之差△? 60nm 显色剂与生成的配合物要易溶于水 显色反应的条件要易于控制 吸光度A与显色剂用量CR的关系图 （1）显色剂用量 3.1.2 显色条件的选择-通过实验确定 选择曲线变化平坦处 适宜浓度： 2011-02 Instrumental Analysis * 在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中A较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。 A pH （2）酸度的选择 存在型体的变化 酸度的影响 副反应 生成不同配比的络合物 * 显色反应的反应速度→时间 一定条件下通过实验作A－t关系曲线 显色产物颜色 保持长时间不变 逐渐减退或加深 一定时间才显色 确定适宜显色时间 （3）显色时间 (5)溶剂 一般尽量采用水相测定。 (4)显色温度 不同的显色反应对温度的要求不同，应通过实验找出各自适宜的温度范围。 2011-02 Instrumental Analysis * 1）干扰离子本身有色：Fe3+、Cu2+、Co2+、Ni2+、Cr3+ 2）干扰离子本身无色，与显色剂生成干扰物质 干扰类型： 3.1.3 共存离子的干扰及消除 在测定条件下有吸收 3）干扰离子与被测离子反应生成配合物或沉淀 显色反应不能进行完全 2011-02 Instrumental Analysis * 控制溶液酸度——双硫腙测Hg2+： 0.5MH2SO4抑制Cu2+、Co2+、Ni2+、Zn2+、Pb2+ 加入掩蔽剂——双硫腙测Hg2+：KSCN掩蔽Ag+，EDTA掩蔽Bi3+ 利用参比溶液除色——葛天青S测Al3+：防Ni2+、Cr3+ + NH4F（AlF63-） +显色剂等试剂，干扰离子显色 选择适当的波长——λmax移至次吸收λ 采用适当的分离方法—