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实验12-13 DNA指纹的遗传分析 一、实验目的 二、实验原理 1. DNA指纹图谱的基本特点 2. DNA指纹分析的原理 1# CS: VNTR D1S80 材料:口腔上皮细胞;VNTR D1S80 试剂: 5%Chelex树脂,琼脂糖,TAE,50bp Marker, 上样buffer,Gelstain,PCR Kit, 蛋白酶K 引物1: 5-GAAACTGGCCTCCAAACACTGCCCGCCG-3 ?引物2: 5-GTCTTGTTGGAGATGCACGTGCCCCTTGC-3 器械:灭菌锅,离心机,电泳装置,凝胶成像仪,PCR仪, 加样枪,枪头,1.5ml EP管,200?l扩增管,棉签(灭菌) 收集DNA样品 PCR扩增D1S80等位基因 扩增产物的鉴定与分析 1. 收集DNA样本 漱口,以灭菌棉签充分擦刮口腔内壁,剪下棉签头放入1ml DW的EP管 振荡10s, 10K离心1 勿搅动沉淀,吸出上清900?l 加200?l 5%树脂,振荡10s,混匀 加2?l PK,混匀,56℃保温5 剧烈振荡10s,沸水浴8 10K离心3,吸取8?l上清用作模板 2. PCR扩增D1S80等位基因 PCR反应体系(20?l ) ?PCR pre-mix 10?l ?引物F (10?mol/L) 1?l ?引物R (10?mol/L)