Agilent_1200型高效液相色谱仪标准操作规程.docVIP

Approvals批准 Dept. 部门 Occupation 职务 Signature 签名 Date 日期 Draftsman 起草人 TC 技术中心 职员 Verifier 审核人 QD 质量管理部 文件主管 Verifier 审核人 QD 质量管理部 经理 Approved by 批准人 GMO 技术中心 总监 1 目的 建立Agilent 1200高效液相色谱仪的操作规程，保证其正确使用。 2 范围 Agilent 1200高效液相色谱仪的操作与维护。 3 职责 操作人员和责任人员对本规程的实施负责。 4 内容 4.1 组成 G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1330B自动进样器恒温器、G1315B可变波长检测器（DAD）、GB16A 柱温箱和一套Agilent 1200 CHEMSTATIONS 软件（软件光盘与说明书原件由工程部保存），打印机。 4.2 在线清洗 若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。首先配制好10%异丙醇溶液，经0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。 4.3 开机 接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后，含四元泵的Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和多波长检测器。约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。 双击桌面上的Instrument 1 Online，计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面。 画面如下所示。 4.4 色谱条件的设定4.4.1 方法的编辑 ● 在method and run control 状态下，单击“method”选择“edit entire method”，请先在复选框中选择method中需要编辑的项目。 ● 进入method information 在method comments 中输入方法的名称及相关描述，参数设置完毕后单击OK。 ● 进入泵参数设置画面，设置泵流速（ml/min），流动相组成，冲洗梯度，停针时间等，参数设置完毕后单击OK。 ● 进入column thermostatted method 编辑状态，选择柱温箱温度，设置完毕单击OK。 ● 进入VWD编辑状态，选择方法中所需波长、峰宽、响应时间等，参数设置好单击OK。 ● 进入signal details 编辑画面，选择下拉菜单中的VWDIA 进行参数设定，点击“DAD”图标，点击“Setup DAD Signals”，在“Signals”下方的空白处输入所需的检测波长，并在前面的方框里画“√”设置完毕单击OK。 ● 进入编辑积分表画面，对所需积分的峰斜率、峰宽、峰高、峰面积、肩峰等参数进行设定，设定完毕后单击OK。 ● 进入specify report 编辑画面，单击screen 前的方框，设置报告。使其输出结果到屏幕，在calculate 选项中选择percent，在report style 选项中选择short， 单击singnal options 设置打印信号范围，单击OK。 ● 进入时间编辑，在data acquisition 和standard data analysis 的复选框中打×，选择好后单击OK，则方法编辑完毕。 ● 在method and run control 状态下，单击method，选择save method as 选项，编辑方法名存储。 4.4.2 进样操作 4.4.2.1 调用方法 进入method and run control 状态下，单击选择method 选项，单击load method 选择所要使用的方法。此时系统将根据所选择的方法进行相应的设置。开始前请根据方法对相应的参数例如：泵参数、自动进样器参数、自动进样器恒温器参数设定、柱温箱参数设定、检测波长设定等进行验证是否与方法设置中的一致。 4.4.2.2 自动进样序列的设定 a 单个样品进行分析 在命令栏“Run control”下，选择“SampleInfo……”或单击快捷操作的“一个小瓶”图标，然后单击样品信息栏内的小瓶，选择“Sample Info……”，即打开了样品信息页面，可输入操作者（Operator Name）、数据存贮通道(Subdirectory)、进样瓶号(Vial)、样品名(Sample Name)等信息，单击“OK”，即完成。 b 多个样品连续进行分析 ● 编