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实验一 果蝇的性状观察和饲养管理 二、预备知识 果蝇(fruit fly,vinegar fly ),广泛存在于全球温带及热带气候区,且由于其主食为腐烂水果,在人类的栖息地如果园、菜市场等地皆可见其踪迹。 黑腹果蝇(Drosophila ) : 双翅目,果蝇属。 特点: 生活史短,每12天左右即可完成一个世代; 饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖; 繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500个左右; 突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察; 染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。 摩尔根提出了基因在染色体上直线排列以及连锁交换定律,并于1933年被授予诺贝尔奖。1946年,摩尔根的学生,被誉为“果蝇的突变大师”的米勒,证明X射线能使果蝇的突变率提高150倍,因而成为诺贝尔奖获得者。 在近代发育生物学研究领域中,果蝇的发生遗传学独领风骚。1995年,诺贝尔奖再次授予三位在果蝇研究中辛勤耕耘的科学家。 果蝇的生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫 果蝇培养基配制 果蝇培养基配方 搬移果蝇至新培养瓶 或麻醉瓶 取新培养瓶一瓶,将棉塞略为松动,放置于右手侧,取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面,将培养瓶置于左手侧,拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端,再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起,以右手两指夹住棉塞外端,再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶瓶底,然后迅速盖上各瓶棉塞。 果蝇操作方法 果蝇可用乙醚麻醉,以方便实验操作。 麻醉方法: 取一麻醉瓶,瓶口应与培养瓶大小相仿,使两瓶口相对,培养瓶在上,用手拍击培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶内,迅速盖上棉塞,滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上,约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。 注意:过度麻醉将导致果蝇死亡。如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏。 果蝇观察、计数 取白瓷板平置于桌面,将麻醉的果蝇倒于白瓷板上,解剖镜或低倍显微镜下进行性状观察,并将雌雄果蝇分开放置。 接种观察过的果蝇(2-3对)到新配置的培养瓶中,为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,先将培养瓶横放,将麻醉的果蝇用毛笔转移到瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。 再麻醉 观察或计数过程中,果蝇可能苏醒,可准备一玻璃培养皿,内以胶带贴一小块棉球,滴入适量乙醚,培养皿口朝下置于一旁备用,如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下,盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。 果蝇形态观察 果蝇具有丰富的外表形态差异,包括眼色、眼形、翅形,刚毛形状与数目等。进行果蝇杂交实验时必须区分性别,务必熟悉雌雄果蝇的差异。 雌雄果蝇主要特征 雌果蝇 个体较大 腹部末端较尖 腹部背面有五条黑条纹 腹部腹面有6个腹片 无性梳 雄果蝇 个体较小 腹部末端较钝 腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面 腹部腹面有4个腹片 前腿跗节上有性梳 果蝇雌雄外形判别 (体形大小) 腹部体节数目雌果蝇6节,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出。 腹部体节数目雄果蝇4节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。 雄果蝇在前肢跗节基部外侧具有性梳 野生型:体色灰,翅膀呈圆卵型,静止时平放交叉重叠,长度约为腹部长度的两倍 双翅目:一对翅膀+一对平衡棒 野生型:翅膀有横隔脉 野生型:眼睛颜色为砖红色,饱满圆形 野生型:刚毛——头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛 果蝇常见突变性状 突变型:黄体(y) 突变型:白眼(w) 突变型:朱红眼(v) 突变型:墨黑眼(se) 突变型:棒眼(B) 突变型:小翅(m) 突变型:卷翅(Cy) 突变型:残翅(vg) 突变型:短翅(dp) 突变型:无横隔脉(cv) 突变型:短刚毛(Sb) 突变型:叉毛(f) * * 一、目的和要求 了解果蝇的生活习惯,掌握果蝇饲养管理的方法,学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。 目前已发现1000多种果蝇,果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。 1908年,遗传学家摩尔根把它带上了遗传学研究的历史舞台,约在此后30年的时间中,果蝇成为经典遗传学的“主角”。 Morgan (1866-1945) 25℃时,从卵至成蝇需10天左右。 果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。 最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。 卵:白色,
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