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- 2016-12-21 发布于浙江
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2.5 核酸的理化性质及其应用 2.5.1 核酸的一般性质 ①RNA为白色粉末,DNA是白色纤维状固体,二者均微溶于水,而不溶于一般有机溶剂中,故常用70%乙醇从水溶液中将核酸沉淀出来。 ②核酸既有碱性基团,又有磷酸基团,故为两性电解质,但酸性强。介质pH大于4时,呈阴离子,电泳时向阳极移动。 ③大多数DNA为线性分子,长度可达数厘米,直径仅为2nm,故DNA溶液粘度很高,分子极易断裂;RNA溶液粘度较小。 2.5.2 核酸的紫外吸收特性(λmax=260nm) 2.5.3 核酸的变性、复性 是双链核酸分子的二个重要物理特性; 双链DNA、RNA双链区、DNA: RNA杂交双链都有此性质。 2.5.3.1 核酸的变性(denaturation) (1)变性的概念:双螺旋结构打开,形成无规则线性结构的过程。 (2)结构和性质的变化: 化学键变化:氢键、疏水键断裂,不涉及共价键的断裂。 结构变化:改变核酸空间结构,一级结构不变。 增色效应:DNA变性后,溶液紫外吸收作用增强的效应。 原因:在双螺旋结构中,有序堆积的碱基紫外吸收降低,当DNA变性后,双链解开,碱基外露, 260nm紫外吸收增大,产生增色效应。 (3)变性的因素: 加热 极端的pH 有机试剂(甲醇、乙醇、尿素等)。 DNA的热变性 特点: 狭窄性:变性温度范围小。 爆发式:像晶体的熔点,到达变性温
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