001山西大学生创新创业训练项目中期进展报告.docVIP

山西省大学生创新创业训练项目 中期进展报告 项 目 名 称 核桃青皮中胡桃醌及其衍生物的高效分离 立 项 等 级 山西省 计划完成时间 2014.06 项目负责人 师亚波 指 导 教 师 冉翠香 填 表 时 间 2013.12.10 山西省“大学生创新创业训练项目”中期进展报告 项目编号 CXCYZD201312 项目名称 核桃青皮中胡桃醌及其衍生物的高效分离 项目类型 √创新训练项目 □创业训练项目 □创业实践项目 项目负责人 师亚波 学号 20100902410 年级 10级04班 所在系部、专业 生命科学系 一、截止目前所完成的主要工作（以条文式列述） 1、预处理：青皮→粉碎→酶解（1%纤维素酶和1%果胶酶，固液比1：20，50℃恒温12h）→微波超声波处理（提取条件：%乙醇，液液比 1：10；微波超声波组合萃取仪处理，时间15min分为3阶段设置温度50、60、70℃，超声波功率800、900、1000W，微波功率200、250、300W，超声波频率25KHz，模式15：10，电机转速900r·min-1）→离心去渣（3000 r·min-1，5min，3次，合并滤液）→减压抽滤（45微孔滤膜）→真空干燥箱干燥（40℃）→。45微孔滤膜含量测定方法的建立色谱条件：色谱柱为Exformma柱( 4.6 ×200 mm，5μm)，流动相为甲醇水( 55:45)，水相用磷酸调PH值约为3.5(磷酸:水为1:500)，流速为0.8mL/min，检测波长为250nm，柱温为30℃。 标准曲线的绘制：精密称取胡桃醌标准品，加甲醇溶解并稀释成浓度为1.210 mg·mL的溶液， 用移液管分别取0.5、1、1.5、2.5、5 mL 置于10 mL的容量瓶，用甲醇稀释至刻度，浓度0.0605、0.1210、0.1815、0.3025、0.6050 mg·mL－１，分别取10 μl依次进样，以峰面积值对样品浓度绘制标准曲线为Y= 809630X-20.41，r= 0.9995，线性范围0.0605 mg·mL-1~ 0.6050 mg· mL－１。 XH-300B型电脑微波超声波组合萃取仪提取条件：%乙醇，液液比 1：10；微波超声波组合萃取仪处理，时间15min分为3阶段设置温度50、60、70℃，超声波功率800、900、1000W，微波功率200、250、300W，超声波频率25KHz，模式15：10，电机转速900r·min-1含量测定方法色谱条件：色谱柱为Exformma柱( 4.6 ×200 mm，5μm)，流动相为甲醇水( 55:45)，水相用磷酸调PH值约为3.5(磷酸:水为1:500)，流速为0.8mL/min，检测波长为250nm，柱温为30℃。 图1 胡桃醌标准品色谱图 图2 供试样品色谱图 优化梯度洗脱条件，得胡桃醌标准品色谱图(图1)。胡桃醌标准溶液在21:05 分时出现最大峰，峰形较好，比较理想。 胡桃醌标准品标准曲线图 图3 胡桃醌标准品标准曲线图 由图3可知，在浓度0.0605、0.1210、0.1815、0.3025、0.6050 mg·mL－１以峰面积值对样品浓度绘制标准曲线为Y= 809630X-20.41，r= 0.9995。精密度试验：取浓度为0.0506、0.1936、0.7125 mg·mL-1 供试液( 低、中、高) 按上述色谱条件连续进样5次，RSD分别为0.87%、1.02%、1.35%。 稳定性试验：在一定时间内测定样品溶液中胡桃醌含量。结果是室温下在甲醇中放置8h，检测含量稳定；氯仿中放置3d，检测含量稳定。 重复性试验：对青皮按样品处理方法制备5份供试液，按上述色谱条件进样后测得胡桃醌的峰面积，代入标准曲线计算，胡桃醌的平均含量为0.39%，RSD= 1.78%()。 加样回收率试验：精密称取已知含量的青龙衣5份，每份1 g，分别精密加入1 mL 浓度为1.010mg·mL-1标准品溶液，其它操作按样品制备方法制备加样回收率试验供试品溶液，按先前规定的色谱条件检测，平均回收率为98.01%，RSD= 1.02%。精密度试验稳定性试验重复性试验加样回收率试验_______________ 年 月 日 系部领导小组意见： 系部领导（签字）____