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《药物分析》实验大纲 氯霉素滴眼液的高效液相色谱分析法 一、目的要求 1. 内标法和外标法测定组分含量的原理与方法； 2. 高效液相色谱仪的结构及正确。 二、基本原理内标外标法内标物可以消除仪器与操作或制备样本时带来的误差，精密称取样品后，加入一定量的内标物，然后制成适当溶液进样分析。根据样品和内标物的重量及其相应的峰面积，求出某组分的含量。 实验方法 （一）实验条件 色谱仪 高效液相色谱仪 色谱柱 C18柱m ODS-BP 5 μm，尺寸：4.6 mm×250 mm， 大连依利特分析仪器有限公司) 温 度 室温 流动相 甲醇:水 (0:20) 流速 0.8 mL/min 检测波长 272 nm （二）标准贮备液的制备 1. 1㎎/mL氯霉素标准贮备液的配制 精密称取氯霉素100 mg至100 mL容量瓶中，以甲醇溶解，并稀释至刻度。 2. mg/mL对硝基苯酚(内标)标准贮备液的配制 精密称取对硝基苯酚约00 mg置l00 mL量瓶中，以甲醇溶解，并稀释至刻度。 (三) 内标法测定氯霉素的含量 1. 相对校正因子的测定 精密吸取对硝基苯酚标准贮备液 mL，置l0 mL容量瓶中，精密加入氯霉素标准贮备液 mL，用甲醇稀释至刻度，摇匀。色谱仪基线平稳后，进样20 μL得色谱图。对硝基苯酚及氯霉素峰面积或峰高，按公式计算相对校正因子本实验中，采用峰: