第7章 基因表达的调控1_原核课件.ppt

5 翻译水平的调控 基因转录形成mRNA后并不一定会翻译形成相应的蛋白质，基因的表达也可以在翻译的水平上受到调节。 如同一操纵子中的几个基因虽然是共同转录的，mRNA水平一致，但他们的产物的量是不同的，这就是依靠翻译水平进行调节的。 如乳糖操纵子中3个基因ZYA的表达水平为1：0.2：0.5。 目前已知的翻译水平上的调节有几个方面：不同mRNA翻译能力的差异、翻译阻遏的作用、反义RNA的作用等。 a）基因起始密码子前面的SD序列不同，mRNA与核糖体的结合程度不同，导致mRNA的翻译起始频率不同，最后的蛋白质的水平就不同。 5.1 不同的mRNA的翻译能力不同 SD序列在翻译过程中起重要作用，不同基因的SD序列虽然保守，但是不同基因的SD序列有所不同。 b) 常见密码子与稀有密码子 含有稀有密码子的基因的翻译速度要比不含有稀有密码子的基因要慢，因为识别稀有密码子的tRNA较少。结果就是含有稀有密码子较多的基因的产物量较少。 c) 重叠基因对翻译起始的控制 同一操纵子中的基因，它们的密码子有的是重叠的，如色氨酸操纵子中的D基因和E基因密码子重叠一个碱基，这样保证核糖体在翻译前面一个基因后不发生解聚而继续翻译下一个基因，保证两者的蛋白的量相同。 甚至有的放线菌中，合成某种抗生素的基因与抗该抗生素的基因也是重叠在一起的，这样保证放线菌自己不会被抗生素杀死，而且是抗性基因的翻译在先。 d) mRNA的稳定性对翻译也有调节作用 不同基因mRNA的半衰期不同，对该mRNA的产物蛋白的量起到调节作用。mRNA的半衰期与其结构等有关，一些mRNA具有特殊的二级结构会阻止RNA酶的降解，延长其寿命。 但是细胞内决定mRNA寿命的因素很多，因此这里有着复杂的调控机制。 细菌核糖体中52种蛋白的基因分别通过至少20个操纵子来进行转录，rRNA基因由7个操纵子来转录，每一种蛋白和RNA都是相互对应，蛋白质翻译出来之后应该与相应的rRNA结合，两者之间保持一定的平衡。 5.2 翻译阻遏 当蛋白产生过多时，蛋白就会与自己的mRNA结合而抑制蛋白的翻译，这叫做“自体调控”，借以维持蛋白和rRNA之间的平衡关系。 核糖体蛋白基因的转录要受到自身产物的调控 mRNA的二级结构（发卡结构等）加上阻遏蛋白等的作用使得多顺反子在翻译过程中，只有前一个顺反子翻译后才能使后一个顺反子得到翻译。 这样使得基因能够按一定的次序表达，不会发生时序上的混乱。 5.3 mRNA的二级结构对翻译的调控作用 单链噬菌体进入细菌后号合成多钟蛋白，包括外壳蛋白、RNA聚合酶等。噬菌体R17只有4个基因，但是合成出的蛋白中，外壳蛋白的数量远远多于RNA聚合酶的数量。其中控制的关键就在于利用mRNA的二级结构，掩盖了某些基因中与核糖体的结合位点，导致某些mRNA不被翻译。 1983年Mizuno等发现反义RNA的调节作用，从而揭示了一种新的基因表达调节机制。反义RNA可以通过互补序列与特定的mRNA相结合，结合位置包括mRNA结合核糖体的序列(SD序列)和起始密码子AUG，从而抑制mRNA的翻译。因此，他们称这类RNA为干扰mRNA的互补RNA (mRNA interfering complementary RNA，micRNA)。 5.4 反义RNA对翻译的调节作用 反义RNA可以通过几种方式调节基因的表达：反义RNA与mRNA上的核糖体结合位点结合，使翻译不能起始；或与RNA结合，形成双螺旋，导致被结合的RNA变得不稳定被降解；或与转录物结合，使转录提前终止。 Mizuno等研究了渗透压变化对大肠杆菌外膜蛋白质基因表达的调节，发现有两种外膜蛋白，OmpC和OmpF，它们的合成受渗透压调节。在高渗的条件下，Omp C的合成增加，而Omp F的合成受抑制；反之，低渗使Omp C合成抑制，而优先合成Omp F。两种蛋白质随渗透压的变化而改变，但两种蛋白质的总量保持不变。 研究发现ompC基因的启动子前有一段DNA序列，叫CX28。当渗透压提高时，会引起omp C基因进行转录，该区域以相反方向转录出一种6SRNA(174 nt)，称为micF。其序列有很大一部分序列与OmpF的mRNA 5’-末端互补，二者可结合而使OmpF的mRNA失去翻译活性。所以高渗时，随着OmpC蛋白合成的增加，OmpF蛋白的合成受到抑制。 大肠杆菌渗透调节中micRNA调节机制 6 遗传重组参与的基因表达调控 鼠沙门氏伤寒杆菌 伤寒杆菌的鞭毛由2种不同的蛋白组成，2种不同的鞭毛蛋白交替表达，可以借以避开宿主免疫系统的攻击。 遗传重组参与的基因表达调控举例 在酵母，噬菌体和锥虫体内均有发现 结束语 大肠杆菌对基因表达的调控机制是多种多样的，基因表达主要在转录水平上进行调控，在翻译水平上也