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一、基因工程原理 从大肠杆菌说起--胰岛素 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!大规模工业化生产不但解决了这种比黄金还贵的药品产量问题,还使其价格降低了30%-50%! 干扰素治疗病毒感染简直是“万能灵药”!过去从人血中提取,300L血才提取1mg!其“珍贵”程度自不用多说。 人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产,均为解除人类的病苦,提高人类的健康水平发挥了重大的作用。 人造血液及其生产 3、基因工程与环境保护 ⑴ 环境监测: 基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来 利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。 ⑵ 环境污染治理: 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类,用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质。 G A A T T C C T T A A G 大肠杆菌 EcoRI 限制酶: 限制酶 G A A T T C C T T A A G 大肠杆菌 EcoRI 限制酶: G A A T T C C T T A A G 大肠杆菌 EcoRI 限制酶: C T T A A G A A T T C G 大肠杆菌 EcoRI 限制酶: * * * * 第2节 基因工程及其应用 能发光的水母 不能发光的热带斑马鱼 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状(目的)。 胰岛素 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4~5g胰岛素 1979年,利用大肠杆菌的DNA分子重组,2000L培养液提取100g , 相当于2吨猪胰腺中提取的量 从大肠杆菌说起--干扰素 一千克纯的干扰素价值可达440亿美元。 传统生产方法:血液中提出白细胞,然后用病毒去感染它,这时会产生干扰素,1个细胞最多生产100~1000个干扰素分子 基因工程:改造的大肠杆菌发酵生产:一天内便可生产20万个干扰素分子。1KG培养物中可以得到20~40mg干扰素 普通棉 苏云金杆菌:含抗虫基因,能表达毒性很强的蛋白质晶体----伴胞晶体,能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。 抗虫棉 苏云金杆菌 Bt基因 普通棉 转基因抗虫棉 普通棉的受精卵 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 普通棉花 苏云金杆菌 提取 抗虫基因 重组DNA 导入 拼接 抗虫棉 “剪刀” (限制酶) “针线” (DNA连接酶) “运载体” 思考: 1、每一步需要哪种工具?各有什么作用 ? 2、每一步是怎样具体操作的? 四个基本步骤: (三)基因操作的基本步骤 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)将目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达 讨论:质粒作为运载体,需要具备什么特点? 1.能够在宿主细胞内复制并稳定保存,相对分子质量小; 2.具有多个限制酶切点以便与外源基因相连; 3.具有标记基因,便于进行筛选. 练习: 假如把人的胰岛素基因“嫁接”到大肠杆菌的体内,这种“嫁接”是怎样实现的呢? DNA 质粒 提供质粒细菌 供体细胞 同种限制酶 DNA 连接酶 重组DNA(重组质粒) 重组质粒 DNA 受体细胞 导入 增殖 目的基因表达的产物 重组DNA(重组质粒) 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 实质 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 提取 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 二、基因工程的应用 三、转基因生物及食品的安全性 1、作物育种 2、药物研制 3、环境保护 讨论: 你认为应该如何对待转基因生物和转基因食品的安全性问题(请说明你
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