第五章 细菌和噬菌体的遗传分析课件.ppt

第五章 细菌和噬菌体的遗传分析 第一节 细菌和病毒遗传研究的意义 一、细菌： 1.大小：细胞较小、长约1－2μ(1μ＝1/1000mm)、宽约0.5μ； 2.结构：鞭毛、细胞壁、质膜、间体、核质体、核糖体； 3.遗传物质：单个主染色体、一个或多个小染色体(质粒)； 4.涂布和繁殖：每个细胞在较短时间内(如一夜)能裂殖到107个子细胞 ，成为肉眼可见的菌落或克隆(clone)。 5.生理特性突变： ①.营养缺陷型： ②. 抗性突变型： 二、病毒： 单倍体，仅一条染色体。 病毒构成：蛋白质外壳+核酸。 病毒分类： 寄主：动物、植物、细菌等； 遗传物质：DNA 或 RNA。 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性： 1．世代周期短： 2 ．容易找出营养缺陷型 3．便于研究基因突变：　　裸露的DNA分子(有的病毒为RNA分子)，易受环境条件的影响而发生突变；单倍体生物，不存在显性掩盖隐性问题，突变均能表现出来。 4．便于研究基因的作用 5.高等动植物具有复杂的体制，比较难以着手研究一些复杂的遗传学问题，例如代谢作用的调控问题等，细菌的体制简单，便于着手，当然在细菌中得到的结论不一定能应用到高等生物中，但是可以得到启发，推动高等生物中这些问题的研究。 第二节 细菌的遗传学分析 一、接合（conjugation）： 细菌的杂交试验 A菌株：met- bio- thr+ leu+，需加甲硫氨酸和生物素。 B菌株：Met+ bio+ thr- leu-，需加苏氨酸和亮氨酸。 A菌株和B菌株营养缺陷型，不能在基本培养上生长。 接合： 概念：是指原核生物的遗传物质从供体(donor)转移到受体(receptor)内的过程。 特点：需通过细胞的直接接触。 二、大肠杆菌F+、F-、和Hfr品系的比较分析 （一）F因子的发现 Hayes实验：大肠杆菌Ｋ12中有两个这样的菌株： A菌株：met-bio-thr+leu+thi+ B菌株：met+bio+thr-leu-thi- str处理A + 未处理B →存活 (有重组,基本培养基 ）  str处理B + 未处理A →无存活  结果: 大肠杆菌中遗传物质的交换不是交互的。事实上，菌株B作为遗传物质的受体，菌株A作为供体。 Hayes的解释：大肠杆菌的某些品系的雄性或供体是被一个致育因子或F因子决定的。具有这种因子的能育品系记为F+，相当于雄性。不含这种致育因子F的品系记为F-，相当于雌性。 F因子：是位于大肠杆菌染色体以外的小环状DNA。 F+细菌的表面有称作性伞毛与F-细菌接合，伞毛发生改变，成为两细胞间的原生质通道，形成细胞质桥或称结合管，F+细胞的F因子通过接合管向F-细胞转递，使F-变成F+。 （二）F因子的结构 F因子是质粒的一种。 ?质粒：是指染色体外的遗传物质。可以自主复制，并在细胞分裂时分配到子细胞中。 特性 ： (1)自主复制 (2)感染 感染性质粒。 质粒中，有的除了可在染色体外自率地增殖外，还可整合到染色体上，成为染色体的一部分，这样的质粒特称为附加体（episome）。 F质粒的结构： (1)原点， 转移的起点 (2)致育基因：形成性伞毛的基因群，接合管 (3)DNA复制酶基因 (4)配对区域（插入序列）insertion sequence （三）F+、F-和Hfr品系F+×F-的特点： (1)F质粒转移的频率高，1/10。 (2)而染色体转移频率低。10-7，使F-→F+ F+品系又称为低频重组品系 高频重组品系Hfr（high frequency recombination） Cavalli（1951）和Hayes（1954）先后从能育的F+品系中分离出两个新的品系，它们和F-杂交，出现重组频率很高。比F+×F-高出1000倍。这种品系称为高频重组品系Hfr。 Hfr 的特点 ： (1)高频重组，染色体转移频率高， ×1000 (2)F质粒转移频率低 F-变成F+很少或没有。 F因子及其在杂交中的行为 三、细菌重组的特点 （一）细菌的交换 原核生物的遗传交换是在一完整的基因组（称为F—内基因子）与一个不完整的基因组（称为供体外基因子）之间进行，所以是在部分二倍体或部分合子间进行 在细菌的重组中，有两个特点 （1）只有偶数交换才能产生平衡的重组子 （2）相反的重组子不出现，所以在选择培养中只出现一种重组子 四、中断杂交实验与重组作图（一）中断杂交试验 基因从Hfr细胞按次序转入F-细胞，可根据基因进入F-细胞的时间和次序作成基因图谱。 50年代，雅科（Jacob F.）和沃尔曼（Wollman E.）：