第三章 动物细胞制药part1课件.ppt

第三章 动物细胞制药 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的结构较原核细胞复杂得多，而且以不 是靠一个细胞包办一切生理活动，各细胞都有明确的 分工。为了适应其功能需要，细胞的形态也有了相应 的变化，我们称这种变化为分化。如：红细胞呈圆盘 形；神经细胞呈纤维形。然而当细胞离体培养时这些 分化的形态经常会发生变化。我们通常将离体培养的 细胞分为：贴壁依赖型（贴壁细胞）和贴壁非依赖型 （悬浮细胞）。 一、动物细胞的形态和生理特点 贴壁细胞 这类细胞的生长必须有给你贴附的支持物表 面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附 因子才能在该表面上生长、增殖。当细胞在该表 面生长后，一般形成两种形态，即成纤维样细胞 型或上皮细胞型。这些细胞形态不是绝对的，它 随培养条件的变化而有所变化。 一、动物细胞的形态和生理特点 悬浮细胞 这类细胞的生长不依赖支持物表面，可在培 养液中呈悬浮状态生长。 一、动物细胞的形态和生理特点 兼性贴壁细胞 这类细胞并不严格地依赖支持物表面生长， 一定条件下，它们还可以在培养基中呈悬浮状 态良好地生长。这类细胞称之为兼性贴壁细胞。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 细胞的分裂周期长 动物细胞分裂周期所需的时间一般为12~48 h，它不仅随细胞种属的不同而不同，同一种 属，不同部位的细胞所需的时间也不同。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象 当细胞在基质上分裂增殖，逐渐会合成片时 ，即每个细胞与其周期的细胞相互接触时。细胞 就停止繁殖。此时若能保持充足的营养，细胞仍 可存活相当一段时间。但细胞密度密度不再增加 ，所以该现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现 象。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 3. 正常二倍体细胞的生长寿命是有限的 当细胞离体培养开始，我们称之为原代培养。 以后经传代后，即成为有限细胞系。细胞经若干 代传代培养后逐渐死亡，该时间的长短取决于细 胞来源的种族和年龄。当细胞经自然的或人为的 因素转化为异倍体后，该细胞即可转变为无限细 胞系，或称连续细胞系。此时细胞的寿命将是无 限的，因此更适合于工业化生产的需要。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 动物细胞对周围环境十分敏感 动物细胞比植物细胞的培养难度大得多，因 为动物细胞膜外没有细胞壁保护，仅有一层很薄 的粘多糖蛋白。因此动物细胞对渗透压、pH、离 子浓度、剪切力、微量元素等的变化耐受力很弱 。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 动物细胞对周围环境十分敏感 动物细胞比植物细胞的培养难度大得多，因 为动物细胞膜外没有细胞壁保护，仅有一层很薄 的粘多糖蛋白。因此动物细胞对渗透压、pH、离 子浓度、剪切力、微量元素等的变化耐受力很弱 。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 动物细胞对培养基的要求高 动物细胞对营养的要求高，不仅需要12种必 需氨基酸，还需要多种细胞因子和贴壁因子等才 能生长，这种要求还随细胞种类的不同而不同。 一、动物细胞的形态和生理特点 动物细胞的生理特点 动物细胞蛋白质的合成和修饰功能与细菌不 同 动物细胞相对于原核细胞，它们多半是分泌 在胞外的，收集纯化方便，得到了较完善的翻译 后修饰，特别是糖基化，因此更与天然的产品一 致，更适合于临床使用。 二、生产用动物细胞的要求和获得 一、生产用动物细胞的获得 原代细胞 原代细胞是直接取自动物组织、器官，经过 粉碎、消化而获得的细胞悬液。 二、生产用动物细胞的要求和获得 一、生产用动物细胞的获得 二倍体细胞系 原代细胞经过传代、筛选、克隆，从而从多 种细胞成分的组织中挑选并纯化某种具有一定特 性的细胞株。该细胞株仍具备“正常”细胞的特点 ：① 它的染色体组型仍是2n的核型；②具有明显 的贴壁依赖和接触抑制的特性；③ 只有有限的增 值能力，一般可连续传代培养50代；④ 无致瘤性 二、生产用动物细胞的要求和获得 一、生产用动物细胞的获得 3. 转化细胞系 这类细胞是通过某个转化过程形成的，他常 常由于染色体的断裂变成了异倍体，从而失去了 正常细胞的特点，而获得了无限增值的能力。由 于转化的细胞具有无限生命力，而且常常倍增时 间较短，对培养条件和生长因子等要求较低，故 更适于大规模工业化生产的需要。 二、生产用动物细胞的要求和获得 二、常用生产用动物细胞的特性 WI-38：二倍体细胞系。该细胞是最早被认为是 安全的传代细胞。在20世纪60年代广泛用于制