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生化生产工艺学 第十章 发酵过程的控制 主要内容 表6-2 一些微生物在不同碳源上的比生长速度和倍增时间 表6-3 补料方法对细胞密度、生长速度及生产率的影响 图10-6 典型的实验室连续培养系统示意图 发酵生产中常常检测的物理参数有下列几个: 1.温度(℃) 是指整个发酵过程或不同阶段中所维持的温度。 2.压力(Pa) 这是发酵过程中发酵罐维持的压力。罐内维持正压可以防止外界空气中的杂菌侵入,以保证纯种的培养。同时罐压的高低还与氧和CO2在培养液中的溶解度有关,间接影响菌体的代谢。罐压一般维持在表压0.02~0.05MPa (0.2~0.5大气压)。 3. 搅拌转速(r/min) 是指搅拌器在发酵过程中的转动速度,通常以每分钟的转数来表示。它的大小与氧在发酵液中的传递速率和发酵液的均匀性有关。 4. 搅拌功率(kW) 是指搅拌器搅拌时所消耗的功率,常指每立方米发酵液所消耗的功率(kW/m3)。它的大小与液相体积氧传递系数KLa有关。 5.空气流量(V/V.min) 是指每分钟内每单位体积发酵液通入空气的体积,它是需氧发酵中重要的控制参数之一。它的大小与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在0. 5~1.5 V/V.min范围内。 6.黏度(Pa . s) 粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志,也能反映发酵罐中菌丝分裂过程的情况。通常用表观粘度表示。它的大小可影响氧传递的阻力,也可反映相对菌体浓度。 发酵过程中检测的化学参数主要包括: 1.pH(酸碱度) 发酵液的pH值是发酵过程中各种产酸和产碱的生化反应的综合结果。它是发酵工艺控制的重要参数之一。它的高低与菌体生长和产物合成有着重要的关系。 2.基质浓度(g%或mg % ) 是指发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度。它们的变化对产生菌的生长和产物的合成有着重要的影响,也是提高代谢产物产量的重要控制手段。因此,在发酵过程中,必须定时测定糖(还原糖和总糖)、氮(氨基氮或胺氮)等基质的浓度。 3. 溶解氧浓度(mmol/ L, mg/ L,饱和度%) 溶解氧是需氧菌发酵的必备条件。氧是微生物体内的一系列的经细胞色素氧化酶催化产能反应的最终电子受体,也是合成某些代谢产物的基质。利用溶氧浓度的变化,可了解产生菌对氧利用的规津,反映发酵的异常情况,也可作为发酵中间控制的参数及设备供氧能力的指标。 4.氧化还原电位(mV) 培养基的氧化还原电位是影响微生物生长及其生化活性的因素之一。对各种微生物而言,培养基最适宜和所允许的最大电位值,应与微生物本身的种类和生理状态有关。 5.产物的浓度(μg/ml) 这是发酵产物产量高低或生物合成代谢正常与否的重要参数,也是决定发酵周期长短的根据。 6 .废气中氧的含量(%) 废气中氧的含量与产生菌的摄氧率和KLa有关。从废气中氧和CO2的含量可以算出产生菌的摄氧率、呼吸商和发酵罐的供氧能力。 7. 废气中CO2的含量(%) 废气中的CO2是由产生菌在呼吸过程中放出的,测定它可以算出产生菌的呼吸商,从而了解产生菌的呼吸代谢规律。 为了解发酵过程中微生物菌体的代谢状况,还需要测定一些与发酵相关的生物学参数,主要有下列几个: l. 菌体浓度 菌体浓度是控制微生物发酵过程的重要参数之一,特别是对抗生素等次级代谢产物的发酵控制。菌体量的大小和变化速度对菌体合成产物的生化反应都有重要的影啊,因此测定菌体浓度具有重要意义。 2. 菌丝形态 在放线菌和真菌这样的丝状菌的发醉过程中,菌丝形态的改变是生化代谢变化的反映。一般都以菌丝形态作为衡量种子质量、区分发酵阶段、控制发酵过程的代谢变化和决定发酵周期的依据之一。 第三节 发酵过程中的代谢变化 微生物的代谢产物,按其与菌体生长、繁殖的关系来说,又分为初级代谢产物和次级代谢产物。 对微生物药物来说,这两类产物都有,特别是抗生素这类次级代谢产物在微生物药物中占有最大的比重。下面将分别介绍这两类产物发酵的代谢变化。 一、初级代谢产物发酵的代谢变化 初级代谢指的是生物细胞在生命活动过程中进行的与菌体的生长、繁殖相关的一类代谢活动,其产物即为初级代谢产物。发酵过程中的菌体浓度、营养基质浓度和产物浓度三者变化的基本过程是同步的。 它们的发酵属于菌体的生长与产物合成偶联的类型。 菌体进入发酵罐后经过生长
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