医学免疫学CDC实验课件.pptVIP

实 验 原 理 免疫预防 第二节 免疫治疗 免疫增强剂：IL-2, IFN-γ, 中药 免疫抑制剂：糖皮质激素，中药 骨髓干细胞治疗， 单克隆抗体导向药物， 基因治疗，LAK, TIL CDC(complement dependent cytotoxicity test) 补体依赖的细胞毒性试验 细胞表面抗原与相应的抗体（IgG1~3或IgM） 特异性结合形成的免疫复合物，可通过经典途径 激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。 因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞， 染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未损伤， 不染色，为阴性反应。 方 法 胸腺细胞（ＬＣ）悬液制备 小组操作 个人滴片 胸腺细胞（ＬＣ）悬液制备 胸腺细胞悬液制备 颈椎脱臼法处死小鼠 ? 暴露胸腔，分离出胸腺 ? 镊子夹住胸腺反复轻轻研磨 ? 单个细胞 PBS洗２次，1000rpm，10min ? 加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液 调节细胞浓度至3-4×107/ml 消毒其胸腹部皮肤 弃上清 计数并检测细胞存活率 37℃ 孵育30 min 100 100 PBS(μl) 100 100 C(μl) 37℃ 孵育30 min 50 50 PBS(μl) 50 50 A