小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验..docVIP

小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验 [murine ascites hepatocarcimoma cell line with lymphatic metastasize experimental operation] 基础医学院x级x班 xxxxxxxxxx 【摘要】【目的】 (1)通过可移植性小鼠腹水型肝癌淋巴道转移实验，从感性上认识肿瘤侵袭与淋巴道转移的生物学特性，了解肿瘤动物实验模型建立的过程及意义； （2）进一步了解动物尸体解剖，组织取材，染色的过程； （3）强化科研思维的培养及实验技能的训练. 【方法】 （1）细胞系获取； （2）615小鼠批下借种肿瘤细胞； （3）组织取材； （4）切片染色：石蜡染色法，H.E.染色法. 【结果】 10只实验小鼠中6只死亡，光学显微镜下观察，在皮下瘤体和同侧腋下淋巴结中发现同样类型的淋巴细胞，远处脏器未见到转移的肿瘤细胞。 【结论】 小鼠腹水型肝癌经淋巴道向其他部位发生转移。 [Abstract][objective] (1)Through portability murine ascites hepatocarcimoma cell line with lymphatic metastasize experimental operation, from perceptual knowledge in tumor invasion and lymphatic metastasis of biological characteristics; (2)Further understand animals autopsy, organization materials, dyeing process; (3)Strengthening the cultivation of scientific thinking and experimental skills training. [Methods] cell line achieve; the armpit subcutaneous tumor cells in mice inoculated; organization based; slice dyeing: Paraffin method, H.E. stain method. [Results] There are 10 laboratory mice, 6 of them are dead. In subcutaneous pseudoaneunsm with the axillary lymph node and found in the same type of cancer cells ,the distance viscera not seen transfer of tumor cells. [Conclusions] portability mice ascites cancer via the lymphatic way to the other part of the shift. 【关键词】小鼠腹水型肝癌细胞株（HCa-F）; 615小鼠淋巴道转移 【Keywordsmurine ascitic hepatocarcinoma cell strain （HCa-F）; metastasis材料与方法 1.实验材料：（1）细胞系：高转移力小鼠腹水型肝癌细胞，由大连医科大学病理教研室建株并保存。（2）实验动物：近交系615小鼠，雌雄兼用，6—8周龄，体重18—22g，由大连医科大学实验动物中心提供。 主要仪器及器皿：搪瓷盆、温度计、离心管、1ml注射器、手术刀、眼科手术剪、眼科手术镊、乳胶手套、生理盐水、1%来苏儿溶液、75%酒精棉、10% 甲醛固定液等。 2.研究方法 细胞系获取从液氮罐中取出高转移力小鼠腹水型肝癌细胞塑料冻存管，立即放入40度的温水中，一分钟内使冻存液全部融化，拉力机送入无菌室中。取出细胞悬液放入离心管中，有生理盐水洗涤2次，离心，弃上清，在加1ml生理盐水吹打均匀向小鼠腹腔内接种0.2mlHCa-F细胞悬液，于第6天无菌条件取腹水。 .615小鼠脚垫接种肿瘤细取615小鼠癌性腹水0.1ml，接种于615小鼠脚垫上。定期观察肿瘤生长及淋巴结肿大情况。四周后处死全部小鼠，取瘤体及相关淋巴结，同时观察肺、肝、肾等器官。将上述组织固定于10%甲醛固定液中，石蜡包埋制片，HE染色，显微镜检查。.组织取材将皮下瘤体、淋巴结、肺、肝、肾选取病变部位，切成厚2—3mm的小于2cm×1cm大小的组织块，10%中性甲醛固定。小块组织一般固定数小时，较大标本需固定24—48小时。经冲洗（用递升浓度的酒精等）、透明（用二甲苯等）、浸蜡（用石蜡），然后用石蜡将组