实验三细胞内液泡系和线粒体的活体染色课件.pptVIP

实验三细胞内液泡系和线粒体的活体染色 实验目的 定义及原理 操作程序 作业 返回大纲 一 实验目的 了解活体染色的定义及原理 熟悉液泡系和线粒体活体染色 的方法和步骤 掌握动植物细胞活体染色的原理和相关的技术 返回 二 定义及原理 所谓活体染色，是指利用某些无毒或毒性较小的染色剂显示出细胞内某些天然构造存在的真实性，而不影响细胞的生命活动，不产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的染色方法。即在染色和观察过程中，细胞或组织始终 保持其生命状态。 活染法弥补了活观察法不能显示细胞精细结构的不足，也避免了固定染色法对细胞结构的破环和造成人为假象的弊病。遗憾的是，适宜活体染色的染料较少，能显示出的结构和种类也不多。 二 定义及原理 活体染色分为体内活染和体外活染两种。前者是将染料注射于生物体内，染色后再取材观察。后者是取材后，对年离体的活细胞进行染色。为保持离体细胞的正常存活，染色时需供给细胞以正常的温度，渗透压，PH等。 关于活染的机制，一般认为，线粒体能被健那绿-B染成兰色，是由线粒体内的细胞色素氧化酶使染料保持在氧化状态，即有色状态，而在周围的细胞质中，这些染料被还原成无色的色基，液泡系被中性红染色，则主要是染料的堆积作用。中性红为碱性染料，其胶粒表面带阳离子，被染部分具阴离子，它们彼此之间就发生了电吸附作用（静电吸附）。 返回 二 定义及原