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- 2016-12-22 发布于浙江
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实验二 细菌的简单染色及革兰氏染色 实验目的 1、掌握细菌染色的原理 2、掌握细菌简单染色和革兰氏方法 实验原理---单染色 1、染色效果与染料及菌体电荷的关系: 碱性染料离子(+) 菌体—(-) 酸性染料离子(-) 菌体—(+) 碱性染料:如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等 酸性染料:伊红、酸性复红或刚果红等 中性染料:前两者的结合物又称复合染料,如伊红美蓝、伊红天青等 2、细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷,所以通常采用碱性染料使其着色。 细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时,细菌所带正电荷增加,因此易被酸性着色。 实验器材 1、材料 大肠杆菌;枯草芽孢杆菌 2、试剂或染液 草酸铵结晶紫;碘液;95%乙醇;复红溶液; 蒸馏水 3、其他 载玻片;接种环;酒精灯;打火机;卫生纸;酒精棉球 实验步骤----简单染色: (1)涂片:取干净载玻片一块,在载玻片的左、右各加一滴蒸馏水,按无菌操作法取菌涂片,左边涂金黄色葡萄球菌,右边涂大肠杆菌,做成浓菌液。再取干净载玻片一块将刚制成的苏云金杆菌浓菌液挑2-3环涂在左边制成薄的涂面,将大肠杆菌的浓菌液取2-3环涂在右边制成薄涂面。亦可直接在载玻片上制薄的涂面,注意取菌不要太多。 (2)晾干:让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。
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