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实验八 利用琼脂糖凝胶分离DNA片段 【实验目的】 1、了解DNA片段回收纯化的基本方法和原理 2、通过本实验学习PCR产物纯化的原理与实验技术，为后续的连接反应和转化反应打下良好的基础。 【仪器与试剂】 仪器：琼脂糖凝胶电泳系统、紫外分析仪、离心机、水浴锅、单面 刀片等 试剂：E.Z.N.A Gel Extraction Kit，50×TAE，Loading Buffer，琼脂糖，灭菌ddH2O等 【实验步骤】 1、使用1×TAE缓冲液制作琼脂糖凝胶，然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。 2、在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶。此时应注意尽量切除不含目的DNA部分的凝胶，尽量减少凝胶体积，提高DNA回收率。并将切下的凝胶块装入提前称好空重（记作：W0）的1.5ml离心管中。 注：切胶时请注意不要将DNA长时间暴露于紫外灯下，以防止DNA损伤。 3、称量含有胶块的离心管总重量（W1），得出凝胶块重量W2（ =W1 - W0 ），并计算胶块体积。计算胶块体积时，以1mg＝1μL 进行计算。 4、向胶块中加入等体积的Binding Buffer (XP2)。 5、55~60℃加热7min左右，中间间断混合（每2~3min），直到胶块完全融化。