实验七 琼脂免疫扩散试验课件.pptVIP

龙岩学院生命科学学院 2012.5.21 一 实验目的： 理解双向琼脂免疫实验原理 掌握双向琼脂免疫实验操作方法 掌握双向琼脂免疫实验结果分析 二 实验原理： 当可溶性抗原(蛋白质、多糖、类脂、血清、各种微生物培养液等)与相应抗体在电解质存在的适当条件下相遇，经过一定时间出现肉眼可见的沉淀现象，称沉淀反应。 用于此反应中的抗原又称沉淀原（precipitonogen）抗体则称沉淀素(precipitin)。 可溶性抗原与抗体在含电解质的凝胶介质(通常用半固体琼脂，起支持作用)内自由扩散，当相对应的抗原抗体相遇时，若比例适当可出现白色沉淀线，称琼脂扩散试验 （agar diffusion test）。 沉淀线的形状、位置，与抗原的浓度、扩散速度相关。 此方法可应用于以下方面： （1）抗原或抗体的纯度鉴定。也可对抗体效价进行初步估算。 （2）用已知抗血清（或抗原）检测未知抗原（或抗体） （3）抗原或抗体相对分子量的估计 双向琼脂扩散常见孔型有三孔型、双孔型、双排孔型、梅花孔型（见图1） 图1 双向免疫琼脂扩散孔型 三 实验材料： 1.高盐生理盐水的琼脂糖 2.待检血清、法氏囊抗原、法氏囊阴、阳性抗体 3.载玻片、湿盒、吸管、打孔器、37℃恒温箱、可调微量加样器等 四