2014高考专题复习选修1-2传统发酵技术的应用.pptVIP

(对应学生用书P225) 知识梳理 一、DNA的粗提取与鉴定 1．DNA提取的方法 (1)基本思路：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学的生物大分子。 (2)原理：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 问题探究1：在DNA的提取过程中，DNA的哪种理化性质是提取、提纯的重要依据？ 提示：DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解度。 二、PCR扩增技术 (1)PCR原理：DNA的热变性。 (2)PCR反应过程 ①变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链。 ②复性：温度下降到50℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 ③延伸：温度上升到72℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸(A，T，C，G)在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 问题探究2：人和哺乳动物的红细胞为什么是提取血红蛋白的理想材料？ 提示：人的哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 自主检测 1．使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为图中(　　) 【解析】　该方法中大分子蛋白质不进入凝胶内部最先流出，小分子进入凝胶内部路径长后流出。 【答案】　B 2．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是(　　) A．前者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好 B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色 C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物为止 D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等 【解析】　Ⅱ.鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。DNA初次析出时，加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。 【答案】　A 3．标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　) A．95℃、55℃、72℃　　　　 B．72℃、50℃、92℃ C．50℃、92℃、72℃ D．80℃、50℃、72℃ 【解析】　当温度上升到90℃以上(90℃～95℃)时，双链DNA解旋为单链，称为变性；当温度下降到50℃左右(40℃～60℃)时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，称为复性；当温度上升到72℃(70℃～75℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。 【答案】　A 4．现代生物已向两个方面发展，宏观研究的水平为生态系统水平，微观研究的水平为分子水平，对于分子的研究，其物质的提取和分离显得尤为重要。下面是物质提取和分离的相关问题，请回答： (一)DNA分子的提取和分离 (1)在提取菜花细胞中的DNA时，采用的是研磨法，为什么不能像用鸡血那样，用蒸馏水使其破裂？___________________________。 (2)在提取实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，说明其作用： ①2 mol/L NaCl溶液：_________________________________； ②0.14 mol/L NaCl溶液：______________________________。 (3)在整个操作过程中，每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠的作用是：_____________________________________________________。 (4)鉴定DNA所用的试剂：________。 (二)血红蛋白的提取和分离 (1)在血红蛋白的提取和分离过程中：粗分离、纯化和纯度鉴定时，都会用到缓冲溶液，其作用是____________________。 (2)在洗脱过程中，对洗脱液的流速要求稳定的目的是： _______________________________________________ (三)不同的化学物质，其理化特性不同，提取方法也有所差异，如胡萝卜素不溶于水，易溶于________，因此可以用________方法进行提取。 【解析】　(一)(1)DNA分子提取中理想的材料为富含DNA的细胞，动物中鸡血细胞核，放入蒸馏水中会使细胞涨破释放出DNA，而植物细胞含有细胞壁不能因吸水而涨破。(2)实验过程中两次用到NaCl溶液，初次为2 mo