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布氏杆菌试管凝集实验 1.实验流程表 2.加石炭酸生理盐水 t1 3.加待检血清 t2-6 4.加抗原 t7 5.结果 6.结果判定 t8 7.注意事项 实验流程表 管号 1 2 3 4 5 6 7 最终血清稀释度 1:25 1:50 1:100 1:200 对 照 抗原对照 阳性血清 阴性血清 1:25 1:25 0.5%石炭酸 2.3 0.5 0.5 0.5 0.5 － － 生理盐水(ml) 被检血清(ml) 0.2 0.5 0.5 0.5 － 0.5 0.5 标准抗原(1:20) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 (ml) 加石炭酸生理盐水 每份血清用试管4支，另取对照试管3支，放置到试管架上。 0.5%石炭酸生理盐水No.1加2.3ml、No.2.3.4.5.加0.5ml、No.6.7不加 加待检血清 再向No.1加待检血清0.2ml，充分混匀，吸取1.5ml弃去，再吸取0.5ml加入No.2管，混匀后吸取0.5ml加入No.3管，直加到No.4。No.5管不加待检血清，No. 6管加，No.7管加1：25的布氏杆菌阴性血清0.5ml 加抗原 各加以0.5%石炭酸生理盐水稀释20倍的布氏杆菌试管凝集抗原0.5ml 结果 在各试管加完抗原后，将7支试管同时充分混匀，置37℃恒温箱中培养4—10h,并观察记录结果 结果判定 ++++ 液体完全透明，菌体完全被凝集呈伞状沉于管底，振荡时沉淀物呈片状、块状或颗粒状（即100％凝集） +++ 液体稍混浊，菌体大部分被凝集于管底，振荡时沉淀物呈片状、块状或颗粒状（即75％凝集） ++ 液体不甚透明，管底有明显的凝集沉淀，振荡时有块状或小片絮状物（即50％凝集） + 液体透明不明显或不透明，有不甚明显的沉淀或仅有沉淀的痕迹（即25％凝集） － 液体不透明，管底无凝集或有一部分沉淀，但振荡时立即均匀散开 注意事项 1待检血清稀释度：牛马1:50、1:100、1:200、1:400 ； 猪羊狗1:25、1:50、1:100、1:200 2 确定血清凝集价（滴度）时，应以出现 ++以上凝集现象的最高稀释度为准 3 牛马的凝集价1：100以上，猪,绵羊,山羊,狗1：50以上为阳性；牛马的凝集价1：50以上，猪,绵羊,山羊,狗1：25为可疑 * * 1.5ml 0.5ml 0.5ml 2.3ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.2ml 2.3ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 2.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 1.5ml 1.5ml 2.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 1.0ml 0