抑菌实验..pptVIP

药物对泌尿系统感染细菌的抑制作用 何帝铭 主要内容 1.实验背景 2.实验目的 3.实验方法 4.结果 实验背景 一、概念 泌尿系统感染(urinarytractinfection,UTI)是指从尿道口到肾脏的泌尿道任何部位发生的细菌感染的总称 。 泌尿系感染也可按病菌种类和病变性质分为非特异性感染和特异性感染，按病程分为急性亚急性和慢性，按发生条件分为原发和继发 二、流行病学 泌尿系统感染感染非常多见。在不同年龄组的人群中，UTI的发生率不同。 新生儿中男童多见，行包皮环切可显著降低感染率。 青少年和成年人群中女性的感染率远远高于男性。 在女性，年龄每增加10岁，感染率便增加1%，至65岁时达10%。 有50%的女性一生中有至少一次尿路感染。 二、泌尿系组成 肾脏：产生 输尿管：运输 膀胱：储存、排出 尿道：排出 三、病原体 非特异性感染：80％由大肠杆菌引起，10～15％由葡萄球菌和克雷伯氏杆菌引起，仅2～5％是由变性杆菌所致 。 特异性感染：结核菌、滴虫、真菌、丝虫、 阿米巴、血吸虫、包虫等。 四、发病机制 细菌侵入机制：菌毛产生粘附素、溶血素、抗血清、内毒素 防御机制： 正常菌群的“抑制平衡”、分泌粘蛋白、尿液的冲刷作用。 五、诱发因素 梗阻因素（结石、肿瘤 ） 机体抗病能力减弱（糖尿病、妊娠、贫血 ） 医源性因素 女性尿道解剖因素 五、感染途径 上行感染 ：绝大多数尿感是由上行感染引起的 血行感染 淋巴道感染 直接感染 ：外伤或邻近肾脏的脏器有感染时，细菌可直接侵入肾脏引起感染 六、治疗方法 1、一般治疗：多饮水，勤排尿，以减少细菌在膀胱内的停留 。 2、抗生素治疗 （？） 细菌耐药 而由于中药的特殊性,细菌较少对中药产生耐药性,并且中药具有毒副作用小,取材方便,经济实惠的优点,因此研究和开发中药抗生素对解决耐药菌株的问题具有重大意义,这也受到了众多学者的广泛关注。 蔓月莓 蔓越莓，又称蔓越橘、小红莓，英文名Cranberry，目前在北美的一些地区被大量种植。 樾橘可杀死泌尿系统里的大肠杆菌，不让它们感染膀胱内膜组织，也可帮助肾脏排解毒素，保持肾脏的健康。 实验目的 中药对泌尿系统感染细菌的抑制作用 实验用药物：A药 实验用细菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌 实验方法 2．贴纸片 ：抗菌药物纸片直径约为6.00～6.35mm，先放于药物中浸泡，待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。把六张纸片贴于平板上。每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。平行3次。 3. 判定结果：培养后取出平板，测量抑菌环的直径。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。 药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。 二、细菌OD值试验 1.配置菌液：将菌株接种于普通琼脂平板上, 置于37 ℃恒温箱中培养24h , 用接种环将菌株转移至4ml 培养基试管中, 培养6-8小时，再取0.1ml 菌液加入液体培养基100ml，稀释1000倍。 2.设置实验组与对照组（设置一组平行组）： 实验组:1ml LB培养基+4ml 药， 对照组:1ml LB培养基+4ml 生理盐水。 3.将稀释1000倍的3种菌液各取0.1ml 分别加入各试管中，培养4小时，测量600nm OD值。 4.分别在2小时，4小时，6小时测量。 结果 1.药敏试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌圈直径小于10mm，属于低敏；克雷伯氏并无抑菌圈出现。 2.细菌OD值： 1）细菌初始浓度越低，抑制效率越高； 2）作用时间6小时比作用时间4小时的效果好。 The End * * 一、药敏试验 1.接种平板 不敏 0 低敏 10以下 中敏 10~14 高敏 15~20 极敏 20以上 敏感度 抑菌圈直径（毫米） 1:1实验组1 1:1实验组2 1:1对照组1 1:1对照组2 1ml LB + 4ml 药 1:2实验组1 1:2实验组2 1:2对照组1 1:2对照组2 1:4实验组1 1:4实验组2 1:4对照组1 1:4对照组2 1ml LB + 4 ml Saline 1:8实验组1 1:8实验组2 1:8对照组1 1:8对照组2 1:16实验组1 1:16实验组2 1:16对照组2 1:16对照组1 注：数据以去离子水调零。 注：放于37℃摇床2h -500.00% 稀释1:16 -0.0005 0.002 稀释1:16 0.00% 稀释1:8 0.001 0.001 稀释1:8 -66.67% 稀释1:4 0.0045 0.0015 稀释1:4 -43.48% 稀释1:2