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葡萄中原花青素的提取 摘要 原花青素是抗氧化、清除自由基能力很强的物质，它能有效清除人体内多余的自由基，具有超强的延缓衰老和增强免疫力的作用。原花青素是一大类多酚化合物的总称， 最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体。本题我们通过标准曲线法对葡萄中原花青素含量进行定量分析；二我们利用超声波破碎提取法分别得出葡萄皮和葡萄籽中原花青素的得率。 切换到完整写信模式?发送? 关键词 原花青素 标准曲线法 定量 超声破碎提取法 得率 前言 原花青素，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多有机溶剂。 一般为葡萄籽提取物或法国海岸松树皮 提取物。原花青素（葡萄籽提取物）是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度，代谢半衰期达7小时之久。葡萄籽原花青素是清除自由基最强的抗氧化剂。在人体内的抗氧化和清除自由基的能力是维生E的50倍，是维生素C的20倍。其作用机理主要是原花青素能够自由基交换一个氢原子或电子，与欲清除的自由基有近似的氧化还原电位，生成的自由基通过离域化而稳定由于原花青素分子结构上有多个酚羟基，它们可以与暂存性自由基结合，生成稳定的自由基，螯合启动脂质过氧化的金属离子，参与抗氧化的协同作用。通过终止自由基链式反应，螯合金属离子，清除活性氧（与封闭系统中的氧反应），原花青素可以减少或消除氧自由基对机体组织和器官的损害作用。原花青素能够通过制造弹性蛋白和胶原纤维加固毛细血管壁，从而进一步防御自由基的侵蚀。高品质的低聚原花青素由于在水中和醇中具有良好的溶解性，加上色泽亮丽，资源丰富，疗效显著，副作用微小的特点，被广泛应用到药物、化妆品和功能性食品等领域。同时其既可作为营养强化剂，又可作为防腐剂替代合成防腐剂（如苯甲酸等），符合人们回归自然的要求，提高了其应用的安全性。原花青素类色素广泛存在于紫甘薯、葡萄、血橙、红球甘蓝、蓝莓、茄子皮、樱桃、红橙、红莓、草莓、桑葚、山楂皮、紫苏、 黑(红)米、牵牛花等植物的组织中。原花青素葡萄皮色素是开发最早且最丰富的原花青素类色素，而大量实验研究表明，葡萄籽中同样含有原花青素，且量比较多。所以本实验中，我们在借鉴一些有关葡萄籽中原花青素的提取的最佳方案的基础上，结合我们所学到的相关知识，设计出了能够分析葡萄中原花青素含量的有效实验方案，并分别得出葡萄籽和葡萄皮中原花青素的提取。 1材料 1．1 原料及主要试剂（皆为国产分析纯） 葡萄；儿茶素；香草醛；无水乙醇；浓硫酸；甲醇 1.2 主要仪器 榨汁机；旋转蒸发仪（RE-52AA-上海亚荣生化仪器厂）；超声波细胞粉碎机（VH-800A-天津奥特赛斯仪器有限公司）；电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9070A上海精宏实验设备有限公司）；生化培养箱（SPX-250-长沙湘仪离心机仪器有限公司）；电子分析天平（AR2140-梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；可见分光光度计（722N-上海精科） 2方法 2.1 标准曲线法 2.1.1对照品储备液，精密称取儿茶素10mg，至于50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成0.2mg/ml的溶液。 2.1.2对照品溶液 分别精密量取对照品储备液 0.0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml，分别置于10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别配成0.00mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的儿茶素甲醇溶液。然后按照表一进行操作。 表一 瓶号 1 2 3 4 5 6 儿茶素浓度（mg/ml） 0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 儿茶素的取量（ml） 0.5 3%的香草醛甲醇溶液(ml) 2.5 30%硫酸溶液(ml) 2.5 反应条件 30度反应15分钟后，在500nm处比色测定吸光值 吸光值 0 0.0335 0.0647 0.0987 0.1336 0.1668 注：以儿茶素浓度为横坐标，比色值为纵坐标，计算回归方程。如图1 图1 2.2 葡萄的处理 2.2.1 分别收集葡萄皮和葡萄籽，放进恒温干燥鼓风箱至水分完全丧失掉。 2