消栓通络胶囊对急性脑缺血再灌注大鼠脑组织TNF-α和IL-1β水平的影响.docVIP

消栓通络胶囊对急性脑缺血再灌注大鼠脑组织的影响 严亚锋白海侠 （陕西中医学院，陕西 咸阳 712046） 摘要 目的：通过实验观察消栓通络胶囊对急性缺血性中风模型大鼠α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）水平的影响，以探讨其治疗缺血性中风的作用机制。方法：采用线栓法致大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型，测定大鼠脑组织中TNF-α和。结果：与模型组比较，消栓通络胶囊大、中(1.68g·kg-10.84g·kg-1) 剂量组可明显降低MCAO大鼠神经行为学评分（P0.01)，可明显降低MCAO大鼠患侧脑匀浆中TNF-α和（P0.01)。结论：消栓通络胶囊可提高急性脑缺血再灌注大鼠的神经功能活动能力，其治疗缺血性中风的作用机制可能与TNF-α和有关。 关键词：消栓通络胶囊；脑缺血再灌注；α；；实验研究 消栓通络胶囊为《中国药典》2010年版一部收载的中成药，处方由川芎、丹参、黄芪、泽泻、三七11味中药组成。具有活血化瘀、温经通络的功效，用于瘀血阻络所致的中风，症见神情呆滞、言语蹇涩、手足发凉、肢体疼痛；缺血性中风及高血脂症见上述证候者[1]。临床观察，其治疗缺血性中风疗效显著，未见不良反应 [2]。本实验通过建立大鼠急性脑缺血再灌注模型，观察消栓通络胶囊对大鼠脑组织α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）水平的影响，以探讨其的作用机制，为消栓通络胶囊的临床提供依据。 1.实验材料 1.1动物 SD大鼠0只，雌雄各半，体重250g±0g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，许可证号SCXK(陕)2007-001。 1.2药品与试剂　受试药：消栓通络胶囊（0.35g×36粒），锦州九泰药业有限责任公司生产，批号111201；临床用药剂量：6粒/次，3次/日，即每人每日6.3 g， 105mg·kg-1体重。鼠TNF-α检测试剂盒（96T，美国RD公司）1.3实验仪器 UV2100型紫外-可见分光光度计，岛津中国有限公司；KDC-160HR型低温离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；XP504电子分析天平，梅特勒-托利多公司；Forma-86c低温冰箱；鱼线(直径0.25 mm)。 2实验方法 2.1分组与给药 将大鼠随机分为组，即假手术组、模型组、消栓通络胶囊大、中、小剂量组(1.68g·kg-1，0.84g·kg-1，0.42g·kg-1，分别相当于人用量的16倍、8倍、4倍)、每组10只。各组均ig给药，1次/d，给药体积为10mL·kg-1，给药7天后1h造模假手术组和模型组用生理盐水灌胃，灌胃量均为10mL·kg-1。 2.2造模方法 末次灌胃1h 后参照改进Longa线栓法[3][4]报道的的方法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注MCAO）模型。大鼠麻醉后，固定。分离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA)，结扎ECA与CCA，用动脉夹夹闭ICA远心端，ECA与ICA分叉处作一V”切口，插入一端加热成光滑球形的线(直径为0.25 mm，距球端18mm处作标记)，插入深度为18±0.5）mm，大脑中动脉导致脑缺血。结扎入口处，线外留约1cm，缝合皮肤。2 h后轻轻提拉所留线头至略有阻力，实现大脑中动脉再灌注。假手术组只结扎CCA与ECA。 2.3指标测定 2.3.1神经行为学评分 各组动物在造模12h后按评分标准[]进行神经行为学评分。0分：无神经症状；1分：不能完全伸展左侧前肢；2分：行走向左侧旋转 ；3分：自主运动时向左侧倾倒；4分：不能自发行走，意识障碍。2.3.2脑组织中TNF-α和测定 造模24 h后断头立即冰浴取脑，分，取手术侧，称重后用4℃生理盐水制成10%脑组织匀浆。匀浆液经3500 r·min-1离心15min，取上清液-20℃冰箱保存。严格按照TNF-α和试剂盒说明书测定脑组织和。 2.4统计学处理 实验数据以表示，采用SPSS12.0统计分析软件进行统计学处理，两组间比较用t检验，以P0.05为差异有。 3.实验结果 3.1消栓通络胶囊对MCAO大鼠神经行为学的影响 结果见表 1。各组动物在造模12h后进行神经行为学评分，假手术组大鼠无神经功能缺损症状；模型组大鼠均出现明显的神经行为缺失症状；与假手术组比较，模型组神经行为学评分明显升高( P＜0. 01) ，说明造模成功。与模型组比较，消栓通络胶囊大、中(1.68g·kg-10.84g·kg-1)剂量组评分明显降低(P＜0.01) 。 表1　消栓通络胶囊对MCAO大鼠神经行为学评分的影响（，n=10）　 组别 剂量(g·kg-1) 动物数（n） 神经行为学评分 假手术组 — 10 0** 模型组 — 10 2.38±0.46 消栓通络胶囊大剂量组 1.68 10 1.32±0.78**