药学分子生物学.docVIP

绪论 分子生物学的定义 分子生物学是在分子水平研究生命现象的科学，是现代生命科学的“共同语言”。它的核心内容是通过对生物的物质基础核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等的研究来阐明生命分子的基础，从而探索生命的奥秘。 DNA是遗传物质的实验证据（1944年 Avery） 他们从S型活菌体内提取DNA、RNA、蛋白质和荚膜多糖，将它们分别和 R型活菌混合均匀后注射人小白鼠体内，结果只有注射S型菌DNA和R型活菌的混合液的小白鼠才死亡，这是一部分 R型菌转化产生有毒的、有荚膜的S型菌所致，并且它们的后代都是有毒、有荚膜的。 (A、T、C、G( dATP、dTTP、dCTP、dGTP （2）二级结构的定义、分类、 定义：指两条脱氧核苷酸链以反向平行的形式，围绕同一个中心轴盘绕所形成的双螺旋结构。 分类： 右手螺旋：A-DNA，B-DNA， C-DNA， D-DNA 左手螺旋：Z-DNA （3）DNA的三级结构定义、主要形式、拓扑异构酶 定义：指在DNA双螺旋结构基础上，进一步扭曲所形成的特定空间结构。 主要结构模式：超螺旋结构 DNA 拓扑异构酶 定义：细胞内存在的一类能催化DNA拓扑异构体相互转化的酶。 种类：拓扑异构酶?和拓扑异构酶Π 三、RNA的结构与功能： （1）原核生物与真核生物mRNA结构差异 原核生物mRNA的结构特点：① 3 `-末端有polyA尾巴② 5 `-末端有帽子结构③ 是单顺反子 真核生物mRNA的结构特点：① 半衰期短② 以多顺反子形式存在③ 5 `-末端有SD序列 （2）tRNA 、rRNA 、scRNA、snRNA、iRNA、gRNA、 端粒酶RNA、核酶 真核生物rRNA：5S、5.8S、18S、28S 原核生物rRNA：5S、16S、23S snRNA：核小RNA 1）分子小，含量不到1%，但拷贝数非常多 2）种类：20多种，其中10几种富含尿苷 酸，称U- snRNA. 3）主要功能是参与基因转录产物的加工 过程（snRNP) scRNA：胞浆小RNA; scRNP iRNA：起始RNA gRNA：指导RNA 端粒(telomere)：人的染色体端粒TTAGGG重复序列 端粒酶(Telomerase) -防止端粒缩短的酶 ●蛋白质+RNA（合成端粒DNA的模板） ●唯一携带RNA模板的逆转录酶 ●端粒酶和衰老、肿瘤有关 核酶（Ribozyme）：有催化活性的RNA 四、核酸的分子杂交： （1）概念：杂交分子、核酸的杂交、探针 杂交分子：已经复性的DNA分子，如果两条链来源不同，则称为杂交分子。 核酸的杂交：序列互补的单链核酸根据碱基配对原则，借助氢键相连而形成双链杂交分子的过程。 探针定义：是指能够与靶分子核酸按碱基互补原则特异性相互作用的一段已知序列的寡核苷酸或核酸。 （2）杂交的种类： Southern、 Northern、Western、 原位杂交 Southern印迹 ●1975年，英，E.M.Southern发明 ●待测核酸：DNA片段 ●探针：标记的单链DNA或RNA Northern印迹 ●1977年，Alwine建立并经Thonas改进 ●待测核酸：RNA片段 ●探针：标记的单链DNA或RNA ●用途：用于外源基因转录产物特异mRNA的检测 Western印迹 ●待测物质：蛋白质 原位杂交 定义：在组织或细胞水平，使用放射性的标记探针与细胞内DNA或RNA杂交的方法。 五、反义核酸： （1）几个概念：反义核酸 、反义技术 反义核酸定义：根据碱基互补原理，用人工合成或生命有机体合成的特定互补的DNA或RNA片段。（掌握） 反义技术定义：根据碱基互补原理，用人工合成或生物体合成的特定互补的DNA或RNA片段抑制或封闭基因表达的技术。（掌握） 　（2）反义核酸的功能 功能：抑制或封闭目的基因的表达。（掌握） 第二章 一、染色体的化学成分及组成 （1）染色体的化学成分 （2）根据DNA复性动力学，可将真核生物DNA序列分 为哪几种四种类型？ 非重复序列：一个拷贝，编码蛋白质和酶的结构基因 轻度重复序列：2-10个拷贝 如组蛋白、酵母tRNA、非洲爪蟾基因 中度重复序列：10-几百个拷贝，非编码序列 高度重复序列：几百-几百万个拷贝 （3）组蛋白的种类 按精氨酸/赖氨酸的比例，将组蛋白分为： H1；H2A；H2B；H3；H4 按组蛋白在染色质上的位置不同，可分为： H1组蛋白；核小体组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）