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食物中氨基酸含量高效液相色谱法测定
测定食物中氨基酸含量一般采用氨基酸分析仪柱后衍生测定但氨基酸分析仪价格昂贵分析时间长且只能用于分析氨基酸限制了氨基酸分析技术的广泛应用。七十年代以来柱前衍生高效液相色谱法开始应用于氨基酸的测定液相色谱通用性强检测灵敏度高,可用于多种物质的分析。
采用柱前衍生紫外检测的方法对几种食物中的种氨基酸进行了测
LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪
LC-10Tvp高压恒流泵:台
SPD-10Tvp紫外检测器:1台 SCL-10Tvp 系统控制器:1台7725i手动进样阀: 1套 色谱工作站:1套(VI2010、N2000、N3000选用)液相色谱柱:1支 (C18 4.6*250mn,5um)微量进样器:1支 (50ul/100ul)
进样支架 :1只(进样阀用)LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪LC-10Tvp梯度高效液相色谱仪是有限公司为了快速地满足多样化的客户需求,在原有的STI501液相色谱仪的基础上经过优化,利用美国先进技术开发设计,国内加工生产的的一款新型的液相色谱仪。LC-10Tvp等度高效液相色谱仪实现了人机对话,可实时对仪器的运行状态进行监控,并可对潜在和已出现的故障做出判断,同时提供在线解决方案。该仪器也全面实现了远程的准无人操作,大大提高了仪器的使用效率,同时通过高精度的AS1000自动进样系统,实现自动化进样,最大程度抑制了样品的交叉污染,提供样品分析精度。LC-10Tvp等度高效液相色谱仪可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
主要特点丰富的功能——符合客户对分析的不同需求硬件具有VP功能,记录维护信息和操作记录,符合GLP/GMP要求;系统控制器增具有时钟、温度计、湿度计等人性化设计的功能。卓越的性能——满足客户对仪器的严格要求检测器采用进口氘灯、光电池以及1200条/mm凹面光栅组成的双光束单色器;精密加工的双透镜流通池,控制波长调节的高精度微处理器以及双路高速的采样频率,确保了低噪声、低漂移及超高灵敏度等特点。VI2010工作站符合多种法规要求。
可靠的结果——满足客户对结果的准确要求与进口仪器做对比试验,分析结果具有高度的一致性。
简便的操作——便于客户对软件的熟练操作软件采用多窗口模式,操作方便。精美的外观——满足客户对仪器的视觉要求外形精美,带来视觉上的享受。技术指标
LC-10Tvp高压恒流输液泵 输液方式 微体积串联双柱塞 最大输液压力 0~9999Psi 流量设定范围 0.001~9.999ml/min (以0.001ml/min步长调节流量) 流量设定值误差 ≤0.5% 流量稳定性误差 ≤0.2%RSD 压力脉动 小于15Psi (流量1mL/min,压力600~1600Psi 。) 泵密封性 压力为5400Psi,时间为10min,压降小于400Psi 。 时间程序功能 有 尺寸 W260×H130×D420mm 重量 11kg 使用环境温度范围 4~40℃ SPD-10Tvp紫外可见可变波长检测器 波长范围 190nm~700nm 波长示值误差 ≤±1nm 波长重复性误差 ≤±0.1nm 动态噪声 ≤ ±0.75×10-5AU (甲醇,1ml/min,254nm,20℃ 。) 静态噪音 ≤ ±0.5×10-5AU (空池,响应时间1秒,20℃ 。) 动态基线漂移 ≤±1×10-4AU/h (甲醇,1ml/min,254nm,20℃ 。) 静态基线漂移 ≤0.5×10-4 (空池,响应时间1秒,20℃ 。) 线性范围 ≥104 最小检测浓度 ≤1×10-9g/mL (萘/甲醇溶液) 定性重复性 RSD6≤ 0.1% 定量重复性 RSD6≤ 0.5% 光谱带宽 6nm 流通池体积 8μL 光程 10mm 时间程序功能 有 尺寸 W260×H130×D420mm 重量 11kg 使用环境温度范围 4~40℃ 仪器
高效液相色谱仪LC-10Tvp,
紫外检测器SPD-10Tvp
真空泵
超声波清洗器
涡旋混合器。
色谱条件色谱柱,
高效柱温℃
检测波长
进样量
梯度洗脱条件,如表实验方法
衍生反应
衍生试剂 与氨基酸迅速反应生成有紫外吸收的高稳定性的和基亚胺 过量的试剂可在慢反应中完全水解过程如下
氨基酸衍生步骤
用微量注射器移取稀释的氨基酸标准液或样品水解液放人样品管底部加人硼酸盐缓冲液,涡旋混合
4.4结果与讨论
回归方程根据工作曲线,以峰面积(A)与浓度(C)进行回归分析,回归方程结果见表2。各氨基酸的检测限
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