PM2.5和SO2联合作用对大鼠肺组织病理学和炎性细胞的影响.docVIP

PM2.5和SO2联合作用对大鼠肺组织 病理学和炎性细胞的影响 学生姓名：闫宇超 指导教师：李瑞金 摘要 【目的】 通过研究PM2.5和SO2的联合作用对大鼠肺组织病理学变化和炎性细胞数量的影响，旨在探讨PM2.5和SO2联合作用引起肺损伤的发病机理，为呼吸系统疾病防治提供新的实验依据，有重要的理论意义。 【方法】 SD大鼠分为空白对照组、生理盐水对照、1.5 mg/kg b.w. 、6 mg/kg b.w. 、24 mg/kg b.w. SO2组（5.6 mg/m3）、1.5 mg/kg b.w. SO2熏气（5.6 mg/m3）6 mg/kg b.w. PM2.5和SO2熏气24 mg/kg b.w. PM2.5和SO2-熏气 96只大鼠，采用实时定量PCR和Western blot的方法测定大鼠肺组织病理学变化和组织炎性细胞数量。 【结果】 结果表明，对于大鼠肺组织，与空白对照组相比，3、4、5组炎症和炎性细胞增加，并随着PM2.5剂量的增加而增加；与和空白对照组对比，7、8、9组炎症和炎性细胞明显增加，随着PM2.5剂量的增加而增加。而和空白对照组【】 关键词 PM2.5；SO2；炎性细胞；炎性细胞数量;巨噬细胞；淋巴细胞；嗜中性粒细胞 近年来，我国北京、石家庄等大城市不定时出现雾霾天气。在雾霾天气中，PM2.5是“罪魁祸首”。PM2.5是指环境空气中直径大于或等于2.5微米的颗粒物，也称为细颗粒物或可入肺颗粒物，是目前一种典型的大气污染物。PM2.5粒径小，面积大，在空气中悬浮时间长，易携带有SO2、重金属、多环芳烃等多种有毒有害物质，容易被吸入人体呼吸道深部，直至进入肺组织及肺泡，引起肺损伤和肺疾病，甚至有引发肺癌的潜在风险，故PM2.5对人体健康和大气环境质量的影响也不容忽视。研究表明，PM2.5不是单纯对呼吸系统有影响，毒，PM2.5能够刺激肺内迷走神经，造成神经紊乱从而波及心脏，并可直接到达心脏，发生心肌梗塞；对于血液系统，PM2.5可能诱发血栓的形成，还可以造成凝血异常，导致血粘度增高[1]。流行病学研究发现，PM2.5暴露可引起肺损伤和肺疾病，如肺功能下降、肺纤维化、慢支、肺气肿、哮喘等，甚至有引发肺癌的潜在风险[2-3]。因此对PM2.5的SO2是一些工业较发达、人口较稠密或燃用高硫煤较多的城市或地区的典型污染物，是一种普遍存在的大气污染物。它以低浓度存在于普通大气中，高浓度存在于某些工作场所。其污染主要是由含硫燃料的燃烧和处理过程中而产生：在造纸厂，钢铁厂、化工厂和硫酸厂等许多职业性SO2接触已很普遍。长期生活在大气污染的环境中，由于二氧化硫和飘尘的联合作用，可促使肺泡纤维增生。如果增生范围波及广泛，形成纤维性病变，发展下去可使纤维断裂形成肺气肿。研究还显示，SO2能引起呼吸系统气道炎症反应增加，与支气管炎和哮喘发病有关。流行病学的研究显示接触SO2可增加哮喘的发病率[4-6]。SO2对大鼠肺炎症反应影响的相关研究有：（1） 1989年Ssndstorm 等报道，健康人暴露于SO2可使其支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞数量增加。当大鼠吸入280mg/m3 SO2时肺部中性粒细胞可比正常对照组增加120倍。（2） 2003年，杜青平和孟紫强研究发现，SO2动式吸入染毒可引起大鼠BALFPM2.5和SO2都对人类环境产生极大的危害。然而，大气污染物是由多种污染物质混合形成的，成分复杂，污染物之间的联合作用更符合实际情况，PM2.5和SO2常共同存在于环境中，暴露人群广泛，然而，二者联合作对机体肺损伤及炎症反应发生的作用机制报道较少，鉴于此，本课题模拟大气PM2.5和SO2污染，可为PM2.5和SO2污PM2.5大流量大气采样器（Thermon Anderson 公司）；荧光实时定量PCR仪(Bio-Rad iQ5 PCR仪，美国伯乐公司)；多功能酶标仪(美国热电公司)； 高速低温离心机（1K-15,美国Sigma公司）、核酸测定仪（美国伯乐公司）及微量移液枪、低温冰箱、高压灭菌锅等。 SO2标准气体（纯度为99.99 %）购自天津赛美特特种气体有限公司，石英纤维滤膜购自美国PALL公司；台盼蓝（Trypan Blue）、瑞氏染料、吉姆萨染料，均购自Solarbio公司。 采用PM2.5大流量大气采样器采集太原市大气PM2.5样品，然后密封储存。采样地点为山西大学环境科学与工程研究中心楼顶，距地面高度约5米。石英纤维滤膜将吸附PM2.5的石英纤维滤膜剪成2 cm×2 cm 大小浸入超纯水中, 低温超声振荡10 min, 4次振荡后纱布过滤洗脱液, 收集PM2.5 溶液, 真空冷冻干燥后-20 ℃保存。使用时以生理盐水配制成不同浓度的悬液。 实验所用成年SD大鼠购自1