贰零壹柒师A计划生物1.pptx

第十五单元　现代生物科技专题第1讲　基因工程知识清单一、基因工程及应用1.基因工程的概念(1)供体:提供　目的基因　。?(2)操作环境:　体外　。?(3)操作水平:　分子　水平。?(4)原理:　基因重组　。?(5)受体:表达目的基因。(6)本质:性状在　受体　体内的表达。?(7)优点:克服　远缘杂交不亲和　的障碍,定向改造生物的　遗传性状　。? 知识清单2.基因工程的基本工具(2)DNA连接酶:①作用:将限制酶切割下来的DNA片段拼接成　DNA分子　。? 知识清单②种类: 知识清单知识清单②对载体的分析: 知识清单知识清单4.基因工程的应用 知识清单二、蛋白质工程1.概念理解(1)基础:蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。(2)操作:　基因修饰　或基因合成。?(3)结果:改造了现有蛋白质或制造出　新的蛋白质　。?(4)目的:满足人类的生产和生活的需求。2.操作过程从预期的　蛋白质功能　出发→设计预期的　蛋白质结构　→推测应有的　氨基酸序列　→找到相对应的　脱氧核苷酸序列　(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。? 知识清单知识清单1.限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别特定的碱基序列,并在特定的位点上进行切割。2.DNA连接酶的作用部位是磷酸二酯键。3.质粒是常用的载体,它是一种小型的环状DNA分子,具有一个至多个限制酶切割位点及标记基因。4.目的基因的获取方法有从基因文库中获取和人工合成。5.基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。6.目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;导入动物细胞常用显微注射法;导入微生物细胞常用感受态细胞法。 考点一考点二考点三考点一　基因工程的基本工具1.与DNA分子相关的酶(1)几种酶的比较: 考点一考点二考点三考点一考点二考点三②切割后产生末端的种类——黏性末端和平末端。a.黏性末端:是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的(错位切),如图②所示: 考点一考点二考点三b.平末端:是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的(平切),如图③所示:③限制酶与DNA连接酶的关系: 考点一考点二考点三2.载体作用(1)作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内;(2)利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。巧辨基因工程操作中基本工具的7个易错点(1)限制酶是一类酶,而不是一种酶。(2)限制酶的化学本质为蛋白质,其作用的发挥需要适宜的理化条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活。(3)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶,目的是产生相同的末端。(4)将一个基因从DNA分子上切割下来,需要切两处,同时产生4个末端。(5)不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的末端都相同,同一个DNA分子用不同的限制酶切割,产生的末端一般不相同。 (6)限制酶切割位点应位于标记基因之外,不能破坏标记基因,以便进行检测。(7)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是DNA分子,能将目的基因导入受体细胞内;膜上载体是蛋白质,与细胞膜的通透性有关。 考点一考点二考点三典例1　(2015·商丘一模)如图为某质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。又知植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。已知耐旱基因两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答下列相关问题: 考点一考点二考点三(1)获得耐旱基因常用基因文库法。理论上,　中含有该生物的全部基因;而　中含有该生物的部分基因。将含有耐旱基因的DNA与该质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶处理后,两两连接的产物有　种。?(2)将上述连接产物导入无任何抗药性的宿主细胞后,将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能正常生长的宿主细胞所含有的连接产物是　。?(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是　,其合成的产物是　。?(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是　。?(5)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱植株与不耐旱植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐旱基因整合到了　(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。? 考点一考点二考点三【解题思路】本题考查基因工程的相关知识。(1)基因文库包括基因组文库和cDNA文库,其中基因组文库中含有该生物的全部基因,而cDNA文库中含有生物的部分基因。将含有耐旱基因的DNA与该质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切,酶切产物用DNA连接酶处理后,两两连接