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CK20单克隆抗体的制备及鉴定 【关键词】 克隆 【关键词】 抗CK20单克隆抗体；SPASepharose；杂交瘤技术；Western Blot；ELISA 　0引言 研究CK20表达用于诊断和评估膀胱肿瘤，已成为国内外研究热点之一. 但目前国内的抗CK20 mAb一直依赖进口，价格昂贵且不便运输，严重影响其推广应用和研究. 我们于2002年成功地从膀胱癌T24细胞系中提取CK20抗原［1］，我们采用CK20抗原通过杂交瘤技术制备抗CK20 mAb，为进一步研制CK20 mAb胶体金试剂盒筛查膀胱癌奠定基础. 　　1材料和方法 1．1材料 ①动物及试剂 BALB/c小鼠购自第三军医大学动物中心，鼠龄6~12 wk，体质量18~22 g，雌雄不限；CK20抗原为本实验室纯化所得；Freund氏完全佐剂和不完全佐剂及HAT培养基为Gibco产品；SP2/0骨髓瘤细胞来自中国预防医学科学院病毒研究所；细胞融合剂PEG4000为Mereck产品，SPASepharose CL4B为Pharmacia产品；IgA, IgM, IgG1, IgG2a, IgG2b及IgG3蛋白均为Sigma产品. ②仪器 国产96孔和24孔培养板、超净