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一种依赖HrpB独立于Ⅲ型分泌系统的胞外天冬氨酸蛋白酶作为青枯菌的一种毒力因子周大祥生物工程学院基因工程中心学号：20111901005摘要：宿主特异性的青枯菌能够引起多种茄科植物萎焉，但对其认识还是很少。为了鉴定细菌的一个宿主特异性基因，选择典型菌株SL341（对辣椒有致病力，番茄无致病力）和SL2029（对番茄有致病力，辣椒无致病力）。我们发现来自SL2029的rsa1基因对SL341菌株失去辣椒萎焉能力。Rsa1基因编码一个11.8KDa的蛋白质，该基因上游有完整的共有hrpⅡ盒模体。尽管rsa1基因表达由HrpB—一种hrp基因表达的转录活性因子—激活，但Rsa1蛋白与天冬氨酸蛋白酶、组织蛋白酶D同源性较差，Rsa1蛋白拥有蛋白酶活性。两种特异性的天冬氨酸蛋白酶抑制剂抑肽素A和邻重氮乙酰-D,L-正亮氨酸甲酯能抑制该酶活性。将54和59位的天冬氨酸用丙氨酸取代，也会失去蛋白酶活性。SL2029菌株的rsa1突变体与野生型菌株相比毒力大大降低，不会引起辣椒萎焉症状。结果表明Rsa1蛋白是一种胞外天冬氨酸蛋白酶，在SL2029菌株侵染番茄扮演重要的作用。引言当植物在自然界遭遇致病菌时，致病菌有其特异性的易感宿主，它们能够定殖并成功的侵染。为了区分宿主-致病菌相互作用的特异性，通常会用到各种基因型和抗病品种。宿主特异性形成致病菌生理小种，它是由宿主抗性蛋白与致病菌无毒蛋白之间的直