胃癌淋巴结微转移的监测及与胃癌预后关系分析.docVIP

胃癌淋巴结微转移的监测及与胃癌预后关系分析 　　【摘 要】目的：利用免疫组化方法检测胃癌淋巴结微转移的敏感指标白细胞分化抗原（cluster of differentiation antigens，CD）CD44和细胞角蛋白（cytokeratin，CK） CK18，分析常规病理未发现转移灶的胃癌淋巴结是否存在胃癌微转移及其与预后的关系。方法：运用免疫组化方法检测CD44和CK18在胃癌患者淋巴结中的表达情况，并结合临床相关资料进行统计学分析。结果：26.7%患者（10.7%淋巴结）CD44阳性， 23.3%患者（9.9%淋巴结）CK18阳性；进展期胃癌淋巴结微转移的发生率明显高于早期胃癌（P?0.05）；存在淋巴结微转移的患者五年生存率明显低于无淋巴结微转移的患者（P?0.05）。结论：利用CD44和CK18因子监测胃癌微转移敏感度高，可以作为临床诊断治疗的参考因素，胃癌淋巴结微转移是影响胃癌预后的重要因素。 　　【关键词】胃癌；微转移；CD44 CK18 　　【中图分类号】R735.2 【文献标识码】A 【文章编号】1004―7484（2013）10―0009―02 　　胃癌的发病率和病死率均居我国常见恶性肿瘤前列，胃癌的复发和转移是影响胃癌患者预后的主要因素，胃癌的微转移则与术后复发和转移密切相关[1]， 因此，早期准确的监测到胃癌微转移的发生，使患者及时合理地接受综合治疗，对于够降低胃癌的复发和转移，提高患者的生存率有重要意义。 　　1 材料与方法 　　1.1一般资料 收集新乡医学院第三附属医院和新乡市中心医院病理科2003年1月至2008年1月因胃癌而行胃癌根治术，常规病理检查淋巴结阴性，30例胃癌患者的100枚组织石蜡块共242枚淋巴结。早期胃癌9例，进展期胃癌21例，所有淋巴结HE染色均没有发现癌细胞。所选取的30例病人均获满意随访结果，随访期限5～10年，其中5例病人死于术后肿瘤复发。 　　1.2主要方法 采用免疫组织化学染色，小鼠抗人CD44（HCAM）单克隆抗体、小鼠抗人CK18单克隆抗体试剂盒购自上海原叶科技有限公司。免疫组织化学检测试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司，试剂公司提供之阳性片为阳性对照，磷酸盐缓冲液代替一抗为阴性对照。用200倍和400倍镜观察各标本染色情况。 　　1.3结果判定标准 免疫组化染色阳性反应为黄―棕色颗粒且明显高于背景染色。阳性染色位于细胞浆，呈弥漫性胞浆着色，但有一个强的边缘染色带。所以阳性判断标准为淋巴结中有一个或多个呈阳性染色，具有上皮形态，且形态不典型的癌细胞。两人双盲法观察切片，在低倍镜下（10×10）观察选择有代表性的区域然后再高倍镜下（10×40）随机观测10个阳性细胞较多的视野。微转移的癌细胞在淋巴结中有两种存在方式：一种以一小簇癌细胞形式存在；另一种以单个癌细胞形式存在。 　　1.4统计学处理 用SPSS13.0软件包进行，两种指标间的比较用配对资料的χ2检验，微转移与临床病理参数间关系用χ2检验。用Kaplan-Meier法制累计生存率曲线；Log-rank检验检测差异之间的显著性意义；多变量生存分析用Cox模型进行；P0.05为具有显著性意义的标准。 　　2结果 　　2.1 CD44和CK18在各样本中表达情况 结果见表1，8例病人（26.7%）共26枚（10.7%）淋巴结CD44阳性细胞出现；7例病人（23.3%）共24枚（9.9%）淋巴结CK18阳性细胞出现。 　　2.2早期胃癌和进展期胃癌淋巴结发生微转移情况对比 CD44监测结果：早期胃癌（30%），共1例（12.5%）患者，2枚（7.7%）淋巴结发现隐匿肿瘤细胞存在；进展期胃癌（70%），共7例（87.5%）患者，24枚（92.3%）淋巴结发现有隐匿肿瘤细胞存在。CK18监测结果：早期胃癌（30%），共1例（14.2%）患者，2枚（8.33%）淋巴结发现微转移。进展期胃癌（70%），共6例（85.7%）患者，22枚（91.8%）淋巴结发现有隐匿肿瘤细胞存在。进展期胃癌淋巴结发生微转移的发生几率高于早期胃癌（P0.05）。 　　2.3 CD44与CK18阳性率与临床几种病理因素关系 　　本研究提示胃癌微转移的发生与病人的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、Borrmann分型无明显关系（P0.05）。CD44与CK18阳性率与临床几种病理因素关系如表2。 　　2.4多变量生存分析 　　Cox多变量生存分析回归模型显示在胃癌的各种临床病理因素中性别、年龄、部位、肿瘤大小、Borrmann分型与预后无关，而淋巴结微转移是影响胃癌预后的独立因子（P?0.05）。见表3。 　　3讨论 　　1993年国际抗癌联盟（UICC）在肿瘤TNM分期补充材料中指出：当微小肿瘤