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专题一 基因工程
1.下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答问题。
(1)在基因工程中,A表示________,如果直接从苏云金芽孢杆菌中获得抗虫基因,①过程使用的酶区别于其他酶的特点是________________________,B表示________。
(2)B→D的过程中,若使用的棉花受体细胞为体细胞,⑤表示的生物技术是________。要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体水平上的鉴定过程: __ _______________________________________
答案 (1)目的基因 能够识别特定的脱氧核苷酸序列 重组DNA (2)植物组织培养 让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定转基因棉花是否具有抗虫性状
2.转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白,如激素、抗体、疫苗、酶等.如图1是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程.请据图回答:
(1)基因工程的核心步骤是 ______ (填字母),此过程所需的工具酶是 _______ .
(2)如图2是运载体和反转录得到的胰岛素基因的片段,已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是﹣G↓GATCC﹣,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣.GeneⅠ和GeneⅡ为质粒上的标记基因,根据图分析,应用限制酶 ________ 切割质粒,用限制酶 _________切割目的基因.构建的重组质粒中,除含有外源基因、标记基因外,还必须含有 _________ 和 _________ .
图 2
(3)B过程中,常用 _________处理使细菌成为感受态细胞,从而利于重组质粒的导入.
(4)如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功,可以采用 _________ 方法.
答案:
(1)A 限制酶和DNA连接酶
(2)ⅠⅡ启动子 终止子
(3)Ca2+
(4)抗原﹣抗体杂交
3.科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖,以寻找一种抑制肿瘤增长的新途径。
方法思路:
①构建干扰质粒_____和对照质粒PSG-CTR(插入不针对人体任何DNA序列的对照组序列)。
②用空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG-AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。
③一段时间后观察检测细胞的________。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:
请回答下列问题。
(1)完成方法思路中的空格:
①________;③_____________________________________________________。
(2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用________培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有________。
(3)端粒酶可以通过以自身的________为模板,________为原料来合成端粒DNA。
(4)分析DNA载体途径的RNA干扰技术能否抑制肿瘤细胞的增殖?
_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
答案 (1)①PSG-AS ③端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况
(2)选择 标记基因
(3)RNA 4种脱氧核苷酸
(4)从结果可知PSG-AS导入肝癌细胞发挥作用后,端粒酶活性降低,细胞凋亡率升高,细胞生长受抑制,说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方法,能较好地抑制肿瘤细胞的增殖。
4.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越__________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是____________________________________________________________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________________________________________________。
(5)为了获
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