云南省西盟佤族自治县第一中学初中生物实验讲义 实验七 绿叶在光下制造有机.docVIP

云南省西盟佤族自治县第一中学初中生物实验讲义 实验七 绿叶在光下制造有机物 一、目的与内容 (一)目的 1．检验绿叶在光下制造的有机物是不是淀粉。 2．探究光是不是绿叶制造有机物不可缺少的条件。 (二)内容 绿叶在光下制造的有机物 二、材料与用品 (一)材料 盆栽的天竺葵(或蚕豆) （生长良好的各种植物绿叶） (二)器具 黑纸片，曲别针，酒精，碘液，小烧杯，大烧杯， 培养皿，酒精灯，三脚架，石棉网，镊子，火柴 (三)试剂 酒精、蒸馏水 三、操作与观察 1﹑把盆栽的天竺葵放到黑暗处一昼夜。 2﹑用黑纸片把叶片的一部分从上下两面遮盖起来，然后移到阳光下照射。 3﹑几小时以后，摘下叶片，去掉遮光的纸片。 4﹑把叶片放入盛有酒精的小烧杯中，隔水加热，使叶片含有的叶绿素溶解到酒精中，叶片变成黄白色。酒精只能隔水加热，否则将发生危险。 5﹑用清水漂洗叶片，再把叶片放到培养皿里，向叶片滴加碘液。 6﹑稍停片刻，用清水冲掉碘液，观察叶色发生了什么变化。 四、问题与思考 1﹑绿色植物制造的有机物是什么? 2﹑为什么要用黑纸片把叶片的一部分遮盖起来? 3﹑为什么要把天竺葵提前放到黑暗处一昼夜? 五、拓展性实验 叶绿体色素的提取、分离及其理化性质 植物色素包含脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素。叶绿体色素是植物进行光合作用吸收光能的重要物质基础。叶绿体色素主要包括叶绿素a、叶绿素b、叶黄素和胡萝卜素，它们与类囊体膜蛋白结合成色素蛋白复合体而存在。根据叶绿体色素的脂溶性特性，常用乙醇、丙酮等有机溶剂离析而从植物材料将其提取。叶绿体色素是由化学结构和相对分子质量不同的多种成分组成，依据它们在有机溶剂中的溶解性和在吸附剂上的吸附性差异，可分离出它们的各组分。从入射光垂直方向可观察色素溶液的樱桃红色——叶绿素荧光。叶绿体色素具有吸收一定波长光的光学特性，不同的色素成分具有不同的吸收光谱特征。叶绿素是双羧酸的酯，与碱可发生皂化发应；在弱酸作用下，其镁原子可被氢原子取代，形成褐色的去镁叶绿素，该物质不稳定，在Cu2+存在时可快速生成铜代叶绿素。 [实验目的] 以植物叶片组织为材料，提取叶绿体色素；以纸层析法分离其成分；鉴定叶绿体色素的理化性质，有助于对其生理功能的理解。 [器材和试剂] 1．植物材料 新鲜的植物叶片组织，如菠菜或小麦叶片。 2．实验器材 分光镜、天平、剪刀、研钵、三角漏斗(中号)、分液漏斗(150 m1)、细玻璃棒或毛细管若干根、量筒、烧杯、试管、电吹风、滤纸、层析缸(用石蜡切片染缸)和酒精灯。 3．实验试剂 丙酮或酒精、碳酸钙粉、石英砂、层析推动剂[按石油醚：丙酮(25:3)比例配置(V／V)]、20％KOH—甲醇溶液、苯、5％HCl、醋酸铜以及醋酸—醋酸铜。 [操作步骤] 1．叶绿体色素的提取 ①称取新鲜的菠菜叶片2g，洗净，擦干，去中脉，剪碎后放入研钵中。 ②加人少许石英砂和CaCO3，再加入无水丙酮10m1，研磨成匀浆，再加丙酮15ml。 ③用漏斗滤去残渣，即可得到叶绿体色素提取液(保存于在暗处备用)。 2．叶绿体色素的分离——纸层析法 ①层析样纸制备 将优质滤纸剪成3cm×9cm的长条，将一端剪成中央留约l cm×0．5cm 的窄条(见图2—7—1)。 ②点样 用细玻璃棒(或毛细管)蘸取叶绿体色素提取液点于层析纸的窄条上端中央部，用电吹风机吹干后在原处重复点样7～8次。 ③展层 在层析缸中加入3～5 ml层析推动液，然后将已点样的层析纸插入缸的侧壁槽内，调节纸条使窄条1／2部分浸入推动液中(注意样点不可触及推动液)，并盖好盖子，于阴暗处展层约10min，即可在层析纸上分辨出4种不同的清楚色层。 ④用铅笔在层析纸上指出4种色层的轮廓，并注明色层的名称和颜色，附在实验报告中。 3．叶绿体色素某些理化性质的观察 ①荧光现象的观察 取浓的叶绿体色素提取液5 ml加人一试管中。在透射光和反射光下观察叶绿体色素提取液的颜色。说明颜色有何不同并解释原因。 ②皂化作用 在观察过荧光现象的叶绿体色素提取液中加入1.5ml的20％KOH—甲醇溶液，充分混匀。再加入5 ml的苯液，并混匀；并沿试管壁缓慢加入1.5 ml的蒸馏水，轻轻混匀，静置待分层。若溶液不分层，可用滴管沿试管壁滴入蒸馏水，边滴加边摇动，直至看到溶液逐渐分为两层为止。上层为溶有黄色胡萝卜素和叶黄素的苯溶液，下层为溶有皂化的叶绿素a和b(以及少量的叶黄素)的丙酮水溶液。皂化作用可分离绿色素和黄色素。 ③吸收光谱的观察 在分光镜狭缝前分别放置盛有丙酮溶液、叶绿体色素提取液、黄色素溶液和绿色素溶液的试管，观察镜筒小孔射入光线所形成的光谱。将观察结果用有色铅笔绘图表示，并说明各种色素在光谱中的吸收区域有何不同? ④H+和Cu2+对叶绿素分子中Mg2+的取代作用 取2只试